Kisspeptin-GPR54對(duì)大鼠卵巢黃體細(xì)胞內(nèi)分泌功能的影響及其機(jī)理.pdf

1、目的:
　　本研究探討kisspeptin/GPR54在大鼠卵巢內(nèi)的表達(dá)變化，以及通過離體細(xì)胞培養(yǎng)，觀察kisspeptin/GPR54對(duì)大鼠卵巢黃體細(xì)胞內(nèi)分泌功能的影響及其機(jī)理。
　　方法:
　　1、通過免疫組織化學(xué)、實(shí)時(shí)定量PCR和免疫印跡技術(shù)觀察卵巢組織中kisspeptin和GPR54表達(dá)水平及表達(dá)部位的變化。
　　2、運(yùn)用離體細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)和放射免疫方法觀察kisspeptin對(duì)基礎(chǔ)和hCG誘導(dǎo)的大鼠卵巢

2、黃體細(xì)胞內(nèi)分泌功能的影響。
　　3、采用免疫印跡技術(shù)觀察kisspeptin對(duì)基礎(chǔ)和hCG誘導(dǎo)大鼠黃體細(xì)胞孕酮分泌可能激活的信號(hào)通路。
　　結(jié)果:
　　1、實(shí)時(shí)定量PCR結(jié)果表明:未成年大鼠的卵巢組織經(jīng)促性腺激素處理后，KiSS-1mRNA表達(dá)水平明顯增加(P＜0.01)，經(jīng)hCG處理后7天，其表達(dá)水平達(dá)到高峰。
　　2、免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示:在未成年大鼠，KiSS-1和GPR54蛋白在初級(jí)卵泡的顆粒細(xì)胞中呈現(xiàn)弱

3、陽(yáng)性的表達(dá)。經(jīng)促性腺激素處理后，KiSS-1蛋白主要表達(dá)于卵泡的膜細(xì)胞、間質(zhì)以及黃體，GPR54蛋白也明顯表達(dá)于黃體。
　　3、在離體培養(yǎng)的黃體細(xì)胞，Kisspeptin-10對(duì)基礎(chǔ)和hCG誘導(dǎo)的大鼠黃體細(xì)胞孕酮分泌具有明顯的促進(jìn)作用(P＜0.01)，而對(duì)雌二醇的分泌沒有明顯的影響(P＞0.05)，同時(shí)伴隨著類固醇合成幾個(gè)關(guān)鍵酶(StAR，CYP11A，3β-HSD)明顯增加(P＜0.05)。
　　4、在離體培養(yǎng)的黃體細(xì)胞，