川芎嗪新型衍生物的設(shè)計(jì)、合成及其生物活性研究.pdf

1、心腦血管疾病是世界范圍內(nèi)危害人類(lèi)生命健康的第一殺手，具有發(fā)病率高、死亡率高、致殘率高、復(fù)發(fā)率高以及并發(fā)癥多這“四高一多”的特點(diǎn)，因此，大力研發(fā)心腦血管藥物已成為全球醫(yī)療衛(wèi)生工作的重要戰(zhàn)略之一。
　　 動(dòng)脈粥樣硬化是引發(fā)缺血性心腦血管疾病的主要因素。在動(dòng)脈粥樣硬化形成的過(guò)程中，血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷是始動(dòng)步驟，其引發(fā)的血小板聚集最終導(dǎo)致了血栓的形成，血栓與組織纖維化鈣化構(gòu)成了動(dòng)脈粥樣硬化。血栓的形成導(dǎo)致血液流通不暢，從而導(dǎo)致局部組織氧

2、和養(yǎng)分的供應(yīng)中斷，造成組織壞死。因此保護(hù)血管內(nèi)皮和抑制血小板聚集是治療缺血性疾病的重要手段。
　　 川芎嗪(Ligustrazine，Lig)是中藥川芎的主要活性成分，具有活血化瘀功效，可擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈，增進(jìn)冠脈流量，并具有抗血栓形成作用，在中國(guó)廣泛應(yīng)用于冠狀動(dòng)脈粥樣硬化和缺血性心腦血管疾病的治療。然而，川芎嗪作為抗缺血性疾病藥物，藥效尚不夠顯著，為達(dá)到治療效果需要較大劑量，且川芎嗪生物利用度低，代謝快，臨床應(yīng)用時(shí)須頻繁給藥，易導(dǎo)

3、致毒副作用的發(fā)生。因此，對(duì)川芎嗪進(jìn)行結(jié)構(gòu)改造，開(kāi)發(fā)高效、低毒的心腦血管疾病治療藥物具有重要意義。
　　 川芎嗪的構(gòu)效關(guān)系研究結(jié)果表明：川芎嗪分子中的吡嗪環(huán)是其藥效團(tuán)，而環(huán)上的取代基主要決定其藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)和毒性。通過(guò)對(duì)目前臨床上一種常用的、安全有效的抗血小板聚集藥物奧扎格雷的結(jié)構(gòu)分析，我們發(fā)現(xiàn)它的結(jié)構(gòu)可以分為堿性雜環(huán)和肉桂酸兩部分。本論文參照奧扎格雷的結(jié)構(gòu)，根據(jù)電子等排原理和拼合原理，以堿性的川芎嗪環(huán)替代奧扎格雷的咪唑環(huán)，經(jīng)過(guò)烴

4、化反應(yīng)與一系列酚羥基肉桂酸類(lèi)化合物如阿魏酸（酯)、咖啡酸（酯)等以醚鍵拼合起來(lái)，設(shè)計(jì)合成了20個(gè)川芎嗪肉桂酸（酯)酚醚類(lèi)衍生物。另外，吡拉西坦、水楊酸類(lèi)及香豆素類(lèi)等藥物在臨床上也廣泛用于抗腦缺血、抗血栓等缺血疾病的治療，根據(jù)拼合原理，我們?cè)O(shè)計(jì)并合成了川芎嗪與吡拉西坦、水楊酸、香豆素類(lèi)等的拼合產(chǎn)物共10個(gè)。以期獲得藥效加合或協(xié)同作用同時(shí)藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)得以改善的新型川芎嗪類(lèi)抗血小板聚集和保護(hù)血管內(nèi)皮的候選藥物。
　　 所有設(shè)計(jì)合成的

5、30個(gè)目標(biāo)化合物均未見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道，化合物的結(jié)構(gòu)由紅外光譜、核磁共振光譜和質(zhì)譜共同得到確證。
　　 我們對(duì)所合成川芎嗪衍生物進(jìn)行以下活性實(shí)驗(yàn)：
　　 (1)抗血小板聚集活性實(shí)驗(yàn)以?shī)W扎格雷作為陽(yáng)性對(duì)照藥，用微量反應(yīng)板酶標(biāo)儀比濁法測(cè)定所合成的化合物對(duì)血小板聚集率的影響?；钚詫?shí)驗(yàn)結(jié)果表明：川芎嗪肉桂酸酚醚類(lèi)衍生物A'2，A'3，A'4，A'5，A'6具有很好的抗血小板聚集活性，IC50分別為0.176，0.157，0.182，0.

6、161，0.054mM；均超過(guò)了陽(yáng)性對(duì)照藥奧扎格雷(IC50=0.360mM)，尤其是化合物A'6（川芎嗪與鄰羥基肉桂酸的酚醚衍生物)活性最為顯著，為陽(yáng)性對(duì)照藥奧扎格雷活性的6.7倍以上。對(duì)化合物的構(gòu)效關(guān)系的分析發(fā)現(xiàn)：(i)羧基是抗血小板聚集的重要基團(tuán)；(ii)肉桂酸苯環(huán)上有一個(gè)甲氧基時(shí)活性較好，兩個(gè)甲氧基造成活性下降；(iii)肉桂酸苯環(huán)上帶有吸電子基如氯、溴等會(huì)降低活性。
　　 (2)保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞過(guò)氧化損傷活性我們以甲基

7、噻唑藍(lán)比色法(MTT)對(duì)所合成的川芎嗪衍生物進(jìn)行了保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞過(guò)氧化損傷活性試驗(yàn)。活性試驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示：化合物A'2，A'5,D1的活性較好，其EC50分別為0.020mM，0.046mM，0.004mM，都遠(yuǎn)低于陽(yáng)性對(duì)照藥川芎嗪(EC50=0.600mM)，最大細(xì)胞增殖率（Pmax％)均超過(guò)85％，具有進(jìn)一步研究的價(jià)值。
　　 總之，我們?cè)O(shè)計(jì)合成了30個(gè)新型川芎嗪衍生物，其中部分化合物顯示了良好的生物活性，具有很好的研究前景，