EGFR在人腦膠質(zhì)瘤細胞中的表達與西妥昔單抗體外藥敏實驗的相關(guān)性研究.pdf

1、研究背景：顱內(nèi)腫瘤是一類嚴重危害人類健康的疾病，其致死率和致殘率都很高。腦膠質(zhì)瘤約占顱內(nèi)腫瘤的40％左右，是最常見的顱內(nèi)腫瘤。目前膠質(zhì)瘤的治療仍以手術(shù)切除為主，輔以放療、化療等綜合治療，但總體療效仍不滿意，復(fù)發(fā)率高，預(yù)后差。近年來惡性腫瘤最大的治療進展是靶向新藥的開發(fā)與使用。西妥昔單抗就是一種新近研制開發(fā)的針對分子靶點的抗癌藥物，其特異性結(jié)合于表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor，EGFR)

2、的細胞外段，能有效阻斷配體表皮生長因子(epidermal growth factor EGF)、a—轉(zhuǎn)化生長因子(a—transforming growthfactor TGF—a)與EGFR的結(jié)合，抑制受體磷酸化，從而阻斷下行信號通道發(fā)揮抗腫瘤作用，其特異性強，副作用小，相對于傳統(tǒng)化療藥具有更大的優(yōu)勢。它在轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌，頭頸部鱗癌及非小細胞肺癌患者中取得了較好的療效，為EGFR陽性的腫瘤患者帶來益處，是一種很有前途的新型抗腫瘤藥物

3、。而西妥昔單抗應(yīng)用于腦膠質(zhì)瘤的報道較少，研究EGFR在人腦膠質(zhì)瘤細胞中的表達，以及這種表達與西妥昔單抗體外藥敏實驗的相關(guān)性，對于評價或估計膠質(zhì)瘤患者的預(yù)后，針對性制定個體化治療策略，最終提高膠質(zhì)瘤患者的生存時間和生存質(zhì)量都具有十分重要的意義。 對象：經(jīng)酶消化法行膠質(zhì)瘤細胞培養(yǎng)成功的標(biāo)本16例。 方法；1．收集山西醫(yī)科大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院神經(jīng)外科2008年2月到2008年10月的膠質(zhì)瘤患者(術(shù)前未行放療和化療)手術(shù)新鮮標(biāo)本1

4、9例，用酶消化法進行膠質(zhì)瘤細胞培養(yǎng)，培養(yǎng)成功16例，細胞爬片后用免疫細胞化學(xué)法以單克隆抗體標(biāo)記EGFR，然后在顯微鏡下選擇10個不重復(fù)的高倍視野(400倍)，記數(shù)選定區(qū)域中染色陽性腫瘤細胞與總體腫瘤細胞的百分比，規(guī)定陽性細胞百分比＜10％為陰性(一)，10％～25％為弱陽性(+)，25％～50％為陽性(++)，＞50％為強陽性(+++)。 2．選取用酶消化法進行膠質(zhì)瘤細胞培養(yǎng)成功的標(biāo)本16例，經(jīng)病理學(xué)和免疫細胞化學(xué)檢測標(biāo)志蛋白質(zhì)

5、酸性纖維蛋白(GFAP)鑒定為膠質(zhì)瘤的細胞，利用西妥昔單抗的血漿峰濃度(PPC)進行體外藥物敏感性實驗，采用MTT法檢測其敏感程度，計算出抑制率。 3．利用統(tǒng)計學(xué)軟件分析研究EGFR在人腦膠質(zhì)瘤細胞中的表達與西妥昔單抗體外藥敏實驗的相關(guān)性。 目的：研究EGFR在人腦膠質(zhì)瘤細胞中的表達與西妥昔單抗體外藥敏實驗的相關(guān)性。 結(jié)論：1．EGFR在Ⅰ～Ⅱ級別組和Ⅲ～Ⅳ級別組人腦膠質(zhì)瘤細胞中的表達陽性率有統(tǒng)計學(xué)意義，隨腫瘤惡

6、性程度增加而增加。 2．西妥昔單抗在Ⅰ～Ⅱ級別組和Ⅲ～Ⅳ級別組人腦膠質(zhì)瘤細胞之間抑制率有差別。對Ⅲ～Ⅳ級膠質(zhì)瘤細胞的抑制率高于對Ⅰ～Ⅱ級別組膠質(zhì)瘤細胞的抑制率。 3．經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理，Ⅰ～Ⅱ級別組EGFR表達陽性率和西妥昔單抗抑制率之間不存在相關(guān)關(guān)系，Ⅲ～Ⅳ級別組EGFR表達陽性率和西妥昔單抗抑制率之間存在正相關(guān)，隨著EGFR表達陽性率的增加，西妥昔單抗抑制率也相應(yīng)增加。 結(jié)果：1．EGFR在Ⅰ～Ⅱ級別組和Ⅲ～Ⅳ級別

7、組膠質(zhì)瘤細胞中的陽性率分別為40.0％和81.8％，Ⅰ～Ⅱ級別組和Ⅲ～Ⅳ級別組陽性率有差別(X2=5.5000 P＜0.05)。 2．西妥昔單抗對Ⅰ～Ⅱ級別組抑制率的均數(shù)±標(biāo)準差為0.07097±0.04086，Ⅲ～Ⅳ級別組抑制率的均數(shù)±標(biāo)準差為0.26370±0.07615，兩組t檢驗，t=-5.26 P＜0.01。說明Ⅰ～Ⅱ級別組和Ⅲ～Ⅳ級別組之間抑制率有差別。西妥昔單抗對Ⅲ～Ⅳ級膠質(zhì)瘤細胞的抑制率高于對Ⅰ～Ⅱ級別組膠質(zhì)瘤細

8、胞的抑制率。 3．Ⅰ～Ⅱ級別組EGFR表達陽性率和西妥昔單抗抑制率之間的Spearman相關(guān)系數(shù)為0.86603，P＞0.05；Ⅲ～Ⅳ級別組EGFR表達陽性率和西妥昔單抗抑制率之間的Spearman相關(guān)系數(shù)為0.92216，P＜0.05。說明Ⅰ～Ⅱ級別組EGFR表達陽性率和西妥昔單抗抑制率之間不存在相關(guān)關(guān)系，Ⅲ～Ⅳ級別組EGFR表達陽性率和西妥昔單抗抑制率之間存在正相關(guān)，隨著EGFR表達陽性率的增加，西妥昔單抗抑制率也相應(yīng)增加。