內(nèi)毒素對腎髓質(zhì)水通道蛋白2表達(dá)影響的實驗研究.pdf

1、目的: 梗阻性黃疸(OJ)是普通外科常見病癥，梗阻性黃疸病人圍手術(shù)期多伴發(fā)不同程度的腎功能損傷，腎功能不全在梗阻性黃疸中的發(fā)生率平均9％，死亡率更高達(dá)68％。腸源性內(nèi)毒素在梗阻性黃疸圍手術(shù)期腎功能損害這一病理生理改變中起到重要作用，也是病人死亡的重要因素。內(nèi)毒素性腎功能損傷主要體現(xiàn)在集合管損傷，而集合管結(jié)構(gòu)和功能的損傷對于腎功能的影響又最為嚴(yán)重，從而影響人體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定。腎臟水重吸收的調(diào)節(jié)主要在集合管完成，集合管水代謝調(diào)節(jié)主要依

2、賴于細(xì)胞膜水通道蛋白(AQP)的作用，其中水通道蛋白2(AQP2)作用尤為重要。目前臨床檢測腎功能的指標(biāo)是肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)，但往往兩者出現(xiàn)改變時腎功損害已較重，給治療帶來困難。既往研究發(fā)現(xiàn)在其他原因所致腎功能損害時AQP2表達(dá)減少，但在內(nèi)毒素血癥時AQP2如何變化并沒有報道。本實驗使用內(nèi)毒素?fù)p傷動物模型研究內(nèi)毒素是否調(diào)控AQP2蛋白的表達(dá)，并且與通常臨床上反映腎功能的Cr和BUN的變化進(jìn)行對比；進(jìn)而探討水通道蛋白在內(nèi)毒素引

3、起腎功能損傷中的診斷價值，這對早期發(fā)現(xiàn)內(nèi)毒素性腎功能損傷，進(jìn)而早期診斷和治療、減少并發(fā)癥和降低死亡率。 方法: 實驗動物選用成年雄性Wistar大鼠80只，隨機(jī)分為實驗組和對照組。實驗組和對照組再各自隨機(jī)分為3、5、7、10、14天組，每組8只。采用腹腔注射內(nèi)毒素(50ug/kg.d)造成大鼠內(nèi)毒素血癥模型，并與對照組(腹腔內(nèi)注射等量0.9％NaCl)對照，分別于3、5、7、10、14天斷頭處死大鼠，留取腔靜脈血5ml，

4、離心后取上清液用全自動生化分析儀測定Cr及BUN；取腎臟髓質(zhì)組織經(jīng)液氮轉(zhuǎn)運(yùn)至-80℃冰箱內(nèi)凍存，采用免疫組化方法檢測實驗組及對照組大鼠腎髓質(zhì)中的AQP2的表達(dá)；并對腎臟髓質(zhì)組織行光鏡下病理形態(tài)學(xué)觀察。 結(jié)果: 實驗組光鏡下見腎集合管上皮細(xì)胞腫脹，排列不規(guī)整，水樣空泡變性、脫落，同時可見局灶上皮細(xì)胞壞死，胞漿崩解，間質(zhì)有大量炎性細(xì)胞浸潤。實驗組AQP2在注射內(nèi)毒素5天后其表達(dá)較對照組顯著減少，且隨著注射內(nèi)毒素時間的延長而減

5、少更加明顯，其改變時腎功能損害可從腎髓質(zhì)形態(tài)學(xué)改變得到證實。Cr在注射內(nèi)毒素10天后開始升高，而BUN在注射內(nèi)毒素14天后開始升高。隨著注射內(nèi)毒素時間延長，腎功損害加重，AQP2表達(dá)減少。 結(jié)論: 1.AQP2在實驗組的腎髓質(zhì)表達(dá)從注射內(nèi)毒素5天后開始減少，Cr在注射內(nèi)毒素10天后開始增加，BUN在注射內(nèi)毒素14天后開始增加。 2.AQP2的減少先于Cr和BUN的改變，可以作為腎功能損害的早期檢測指標(biāo)，從而促進(jìn)早