內襯上皮的管狀組織工程軟骨的研制.pdf

1、第一軍醫(yī)大學2。。2級碩士學位論文誓818561內襯上皮的管狀組織工程軟骨的研制Fabricationofallogeniccartilageintubeshapeliningwithepithelialbyanovelcopolymerscaffold課題來源：廣東省自然科學基金資助課題(990418)專業(yè)名稱學位申請人指導教師答辯委員會主席答辯委員會成員耳鼻咽喉科學程友黃金中教授ProfJ[nzhongHuang李添應教授李添應教授

2、郭夢和教授黃金中教授梁健新副教授謝南屏教授文忠教授論文評閱人李添應教授郭夢和教授2005年6月6日廣州內襯上皮的管狀組織工程軟骨的研制碩士研究生程友指導老師黃金中中文摘要目的：一對人鼻中隔軟骨細胞培養(yǎng)法進行改良并觀察改良法培養(yǎng)的人鼻中隔軟骨細胞的生物學特性，為軟骨組織工程提供更多高活性的種子細胞。二觀察甲殼胺無紡布在體外、體內降解性能和規(guī)律及其生物相容性，探討其作為軟骨組織工程細胞支架的可行性。三探討一種新型聚合物支架制作方法，即制作力

3、學性能、可塑性、三維結構良好的以聚丙交酯一乙交酯共聚物Poly(d／一lacfide—CO—glycolide)(PLGA)包埋甲殼胺無紡布的新型支架，使之符合中空管狀喉、氣管組織工程軟骨構建的特殊要求。四研究以PLGA包埋甲殼胺無紡布為細胞支架，在有免疫力的動物體內構建內襯上皮的管狀組織工程軟骨的可行性。方法：采用改良法(即軟骨細胞懸液和軟骨塊共同培養(yǎng)法)體外培養(yǎng)人鼻中隔軟骨細胞，對其進行倒置相差顯微鏡動態(tài)觀察、甲苯胺藍異染和II型膠

4、原的免疫組化染色，并測定”SNa2S04摻入量以觀察軟骨細胞蛋白多糖合成量，在細胞表型和功能方面進行鑒定并與常規(guī)法(即單純細胞懸液培養(yǎng)法)比較。：二將甲殼胺無紡布稱重后分組置于1％溶菌酶和01％溶菌酶溶液中，37℃恒溫震蕩水浴，按時間順序取出80℃烘干4h后稱重，觀察其體外降解速度；將其植入兔皮下，分別于2、4、8、12周取材進行大體觀察和HE染色光鏡檢查。三將2倍甲殼胺無紡布質量的PLGA溶解于氯仿中，聚合物濃度為2％，將甲殼胺無紡布