體外軟骨細胞與軟骨單位共培養(yǎng)構(gòu)建軟骨組織工程種子細胞的最佳比值.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：利用兔關(guān)節(jié)軟骨細胞與軟骨單位建立混合共培養(yǎng)體系，明確體外軟骨細胞與軟骨單位共培養(yǎng)構(gòu)建軟骨組織工程種子細胞的最佳比值。
　　方法：將兔膝關(guān)節(jié)軟骨分別用酶消化為軟骨細胞與軟骨單位后，按一定比例混合配制，分為五組，A組:單純軟骨細胞組；B組:比值為2:1的軟骨細胞/軟骨單位組；C組:比值為1:1的軟骨細胞/軟骨單位組；D組:比值為1:2的軟骨細胞/軟骨單位組；E:單純軟骨單位組。以2×105個細胞/孔接種于放有蓋玻片的六孔板中，使

2、細胞單層貼壁培養(yǎng)爬片，待細胞生長6日爬滿后，進行指標檢測：HE、番紅O染色觀察細胞組織形態(tài)學的變化，RT-PCR檢測Agg、II型膠原和I型膠原的基因表達水平。Elisa檢測上清液GAG、II型膠原的含量。
　　結(jié)果：共培養(yǎng)組細胞形態(tài)正常。通過RT-PCR檢測Agg、II型膠原和I型膠原的基因表達，Elisa檢測上清液GAG、II型膠原的含量表明：采用共培養(yǎng)方法的軟骨細胞與軟骨單位的混合組中細胞代謝的表達要明顯高于單純軟骨細胞組，

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