內(nèi)皮素-1與血管緊張素Ⅱ在環(huán)孢素A慢性腎毒性中作用的研究.pdf

1、目的:研究內(nèi)皮素-1(ET-1)和血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)在環(huán)孢素A(CsA)慢性腎毒性大鼠模型中的作用以及兩者間關(guān)系的初步探討。 方法:Wistar雄性大鼠24只，體重248±14.5g，適應性飼養(yǎng)1周后，隨機分為以下4組：A組為CsA溶劑(橄欖油)對照組；B組CsA10mg/(kg·d)組；C組為CsA15mg/(kg·d)組；D組為CsA20mg/(kg·d)組，皮下注射4周。給藥前2天腹腔注射速尿8mg/kg，實驗期間各

2、組大鼠均給予鈉缺乏飲食，造成鈉耗竭。每天根據(jù)大鼠體重變化，調(diào)整CsA用量。4周后，1％戊巴比妥鈉5ml/kg麻醉大鼠，取靜脈血，用于肌酐、CsA濃度、ET-1和AngⅡ含量的檢測。取一腎置于10％中性福爾馬林緩沖液中供病理及免疫組化檢查，另一只置于液氮中保存，用于放射免疫檢查ET-1和AngⅡ含量。免疫組化結(jié)果用真彩色病理圖像分析系統(tǒng)自動測量，最后取平均值。計量資料以x±s表示，組間差異比較采用單因素方差分析，由SPSS12.0統(tǒng)計軟件

3、進行分析。 結(jié)果:A組未見形態(tài)學異常。處理組見出現(xiàn)CsA慢性腎毒性的典型表現(xiàn)：腎小管上皮細胞濁腫，小管上皮細胞空泡樣變性，入球小動脈可見玻璃樣變，管壁增厚僵硬，毛細血管充血。腎小球系膜輕度或中度增生。與對照組相比，實驗各組Scr升高(P＜0.05)，Scr與CsA血藥濃度無明顯相關(guān)性，各處理組間Scr無顯著性差異(0.75±0.12mg/dl、0.78±0.10mg/dl、0.76±0.12mg/dl，P＞0.05)。血漿ET-

4、1含量各組無顯著性差異(P＞0.05)。腎皮質(zhì)中ET-1含量B組(12.08±0.21pg/g)較A組(5.9±0.26pg/g)升高2倍，C組(17.00±0.22pg/g)較A組升高2.88倍，D組(12.9±0.19pg/g)增高2.19倍。髓質(zhì)ET-1含量B組(24.09±0.26pg/g)較A組(10.69±0.34pg/g)髓質(zhì)升高2.25倍，C組(35.00±0.49pg/g)升高3.27倍，D組(10.21±0.13pg

5、/g)較A組降低(以上均P＜0.05)。血漿AngⅡ含量B組(678.1±181.9pg/ml)較A組(367.8±107.4pg/m1)增加1.84倍，C組(778.7±166.2pg/m1)較A組增加2.12倍，D組(994.4±190.7pg/m1)增加2.70倍。B組皮質(zhì)(9.27±0.06μg/g)較A組(3.42±0.19μg/g)增加2.71倍，C組(12.07±0.31μg/g)增加3.53倍，D組(10.06±0.13

6、μg/g)增加2.94倍。B組髓質(zhì)(76.62±12.88μg/g)較A組(40.35±6.36μg/g)增加1.90倍，C組(99.35±8.63μg/g)增加2.46倍，D組(37.24±10.67μg/g)無顯著性差異(P＞0.05)。免疫組化結(jié)果示AngⅡ和ET-1分布和變化一致，A組腎組織中AngⅡ和ET-1主要分布在遠曲小管和集合管上皮細胞，呈棕黃色顆粒狀；近曲小管上皮可見少量細顆粒；部分腎小球系膜細胞和球囊上皮細胞胞漿中亦

7、見稀疏的棕黃色顆粒；少數(shù)腎間質(zhì)血管內(nèi)皮細胞及血管壁平滑肌中也含有棕黃色顆粒。處理組AngⅡ和ET-1表達明顯增加。遠曲小管、近曲小管和集合管表達均增強。系膜細胞、系膜基質(zhì)和小球內(nèi)皮細胞的表達隨CsA濃度增高而增強。表達隨CsA劑量增加而增加，但D組髓質(zhì)表達較A組無顯著性差異。 結(jié)論:CsA慢性腎毒性造成的腎功能減退與藥物劑量和血藥濃度無明顯關(guān)系，低劑量CsA即可造成腎功能的損傷，檢測CsA的血藥濃度不能準確判斷腎功能變化。ET-

8、1主要以局部自分泌和旁分泌方式參與了腎小管損傷，對腎小管的損傷呈劑量依賴性。ET-1在腎小球損傷中的作用及ET-1分泌調(diào)節(jié)機制仍需進一步探討，循環(huán)ET-1對CsA慢性腎毒性影響不大。高劑量組髓質(zhì)AngⅡ和ET-1含量減少，可能與腎小管萎縮后失去分泌生物活性物質(zhì)功能有關(guān)。隨著CsA濃度的增高，局部AngⅡ增加，這可能是處理組腎組織中ET-1增高的原因之一，CsA也可能通過促進局部ET-1的分泌來調(diào)節(jié)AngⅡ。處理組局部皮質(zhì)、髓質(zhì)AngⅡ濃