葛根素對視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞保護(hù)作用的初步探討.pdf

1、一、視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞定量分析 目的探討視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)(Retinal Ganglion Cells,RGCs)標(biāo)記、鋪片及圖像計數(shù)方法.材料與方法12只SD大鼠依此進(jìn)行:(1)雙側(cè)上丘兩點法注射熒光金逆行標(biāo)記RGCs;(2)定向鋪片:標(biāo)記4天后眼球固定、分離視網(wǎng)膜、定向平鋪.距視乳頭中心2mm上下鼻顳各拍攝照片一張,放大倍數(shù)125×.(3)圖像分析:使用彩色顆粒分析軟(Colour Pellet Analysis System, CPA

2、S)做RGCs計數(shù).結(jié)果RGCs計數(shù):左眼474±33.7,右眼446±56.5;雙眼無差異.結(jié)論經(jīng)雙側(cè)上丘兩點法熒光金逆行標(biāo)記RGCs標(biāo)記良好.二、大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞損傷特點 目的探討建立SD(SpragueDawley)大鼠視神經(jīng)夾傷模型,研究大鼠RGCs丟失的特點.材料與方法14只大鼠隨機分為2組,每組7只.右眼視神經(jīng)夾傷,左眼作為正常對照眼,用夾持力40g的微型視神經(jīng)夾于球后2mm夾持視神經(jīng)60秒.術(shù)后24天雙側(cè)上丘兩點法熒光

3、金逆行標(biāo)記.術(shù)后28天視網(wǎng)膜定向鋪片及圖像分析.將上下左右4張照片RGCs數(shù)量累加做為單眼RGCs相對密度(單位:個數(shù)/4標(biāo)準(zhǔn)區(qū)總面積),RGCs存活率=右眼RGCs相對密度/左眼RGCs相對密度×l00.對RGCs邊界清楚的10只模型做左右眼RGCs面積(單位:像素)的比較.結(jié)論該實驗?zāi)Ｐ涂杀刃暂^強,RGCs損失以小細(xì)胞丟失為主.三、葛根素對視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞保護(hù)作用 目的初步探討葛根素對視神經(jīng)夾傷后的視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞保護(hù)作用材料與方法

4、40只SD大鼠分5組,每組8只.A組:葛根素低劑量組(5mg/100g體重)、B組:葛根素中劑量組(10mg/100g體重)、C組:葛根素高劑量組(20mg/100g體重)、D組:陰性對照組(生理鹽水)、E組:陽性對照組:莫尼定(0.1mg/100g體重).右眼視神經(jīng)夾傷,左眼正常對照.與第二部分相似方法進(jìn)行視神經(jīng)夾傷、經(jīng)上丘熒光金逆行標(biāo)記、視網(wǎng)膜定向鋪片、圖像分析.結(jié)論該實驗中葛根素中劑量組、高劑量組及莫尼定組對視神經(jīng)損傷后的RGCs