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1、目的: 觀察轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(TGF-β1)在哮喘小鼠肺組織中表達(dá)變化及其對(duì)氣道平滑肌細(xì)胞(ASMC)增殖的影響:與地塞米松(DXM)的作用相比較,探討鹽酸戊乙奎醚對(duì)TGF-β1表達(dá)及ASMC增殖的干預(yù)作用。 方法: 32只雌性清潔級(jí)BABL/c小鼠隨機(jī)被分為4組(n=8):對(duì)照組(A組)、哮喘組(B組)、鹽酸戊乙奎醚干預(yù)組(C組)、DXM干預(yù)組(D組)。A組給予0.2ml生理鹽水霧化激發(fā);B、C、D組小鼠于第0、7、14d給
2、予[卵白蛋白(OVA)25μg+AL(OH)3lmg]生理鹽水0.2ml腹腔注射致敏,第22天起,每天以2%的OVA霧化激發(fā),每次30分鐘,持續(xù)4周。在每次霧化前1h,C、D組分別給予鹽酸戊乙奎醚0.5mg/kg及DXM3mg/kg腹腔注射干預(yù),A、B組腹腔注射生理鹽水對(duì)照。取左肺支氣管肺泡灌洗液(BALF)做細(xì)胞分類計(jì)數(shù),并用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)法檢測(cè)上清液中活性TGF-β1的濃度;取右肺組織做石蠟切片,行HE染色、TGF-
3、β1和增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)免疫組化染色,采用圖像分析軟件測(cè)定管腔基底膜周長(zhǎng)(Pbm)、氣管壁總面積(WAt)、氣道平滑肌面積(WAm)、ASMC核數(shù)(N),結(jié)果以Pbm標(biāo)化,并測(cè)定TGF-β1在ASMC的灰度值。 結(jié)果: B組BALF中嗜酸粒細(xì)胞(EOS)百分比、活性TGF-β1濃度分別為(3.57±0.67)%、(733.88±36.26)pg/ml,與A組(1.00±0.93)%、(142.38±24.70)pg/ml
4、比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);C、D組分別為(2.38±0.47)%、(337.38±39.40)pg/ml,(2.14±0.52)%、(322.63±21.61)pg/ml,與B組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),C、D組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。圖像分析示:WAt/Pbm、WAm/Pbm、N/Pbm B組分別為:(13.49±3.83)μm2/μm、(4.65±0.81)μm2/μm、(7.37±0.86)
5、個(gè)/mm,與A組(4.31±0.56)μm2/μm、(1.19±0.40)μm2/μm、(2.47±0.45)個(gè)/mm比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);C、D組分別為(6.67±2.11)μm2/μm、(2.12±0.45)μm2/μm、(4.65±0.78)個(gè)/mm,(7.23±1.77)μm2/μm、(2.22±0.70)μm2/μm、(4.01±0.73)個(gè)/mm,與B組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),C、D組間比較差異
6、無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);灰度分析示:TGF-β1在ASMC的灰度值B組為(91.88±16.25),與A組(56.00±12.67)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),C、D組分別為(69.50±11.88)、(64.87±6.16),與B組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),C、D組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);相關(guān)性分析結(jié)果:ASMC中TGF-β1的灰度值與WAt/Pbm、WAm/Pbm、N/Pbm均呈正相關(guān)(r
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