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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
觀察艾灸對(duì)佐劑性關(guān)節(jié)炎模型(AA)大鼠“足三里”穴位局部血流影響的特征性改變,從AT1、TRPV2角度探討艾灸對(duì)AA模型大鼠“足三里”穴位局部血流的調(diào)控機(jī)制。
方法:
?。?)將 Wistar大鼠隨機(jī)分為空白組、模型組、模型+艾灸組,以完全弗氏佐劑(FCA)誘導(dǎo)建立AA大鼠模型。其中,模型+艾灸組在左側(cè)“足三里”穴位局部進(jìn)行溫和灸干預(yù),每日1次,共15次。采用激光多普勒血流監(jiān)測(cè)技術(shù)(LDF)對(duì)“足三里
2、”穴位局部血流進(jìn)行監(jiān)測(cè),觀察艾灸對(duì)“足三里”穴位局部血流灌注量(PU)、移動(dòng)的血細(xì)胞聚集程度(CMBC)、移動(dòng)的血細(xì)胞平均移動(dòng)速度(V)的影響;采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)、免疫組化(IH)、蛋白免疫印跡(WB)檢測(cè)“足三里”穴位局部AT1、TRPV2的表達(dá)量的變化。
?。?)將 Wistar大鼠隨機(jī)分為模型+艾灸組、模型+AT1阻斷+艾灸組、模型+TRPV2阻斷+艾灸組,以完全弗氏佐劑(FCA)誘導(dǎo)建立AA大鼠模型,以纈沙
3、坦灌胃的方式對(duì)大鼠進(jìn)行AT1阻斷,以釕紅(RR)局部注射的方式對(duì)大鼠進(jìn)行TRPV2阻斷。三組均在左側(cè)“足三里”穴位局部進(jìn)行溫和灸干預(yù),每日1次,共15次。采用激光多普勒血流監(jiān)測(cè)技術(shù)(LDF)對(duì)“足三里”穴位局部血流進(jìn)行監(jiān)測(cè),觀察艾灸對(duì)“足三里”穴位局部血流灌注量(PU)、移動(dòng)的血細(xì)胞聚集程度(CMBC)、移動(dòng)的血細(xì)胞平均移動(dòng)速度(V)的影響;采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)、免疫組化(IH)、蛋白免疫印跡(WB)檢測(cè)“足三里”穴位局部A
4、T1、TRPV2的表達(dá)量的變化。
結(jié)果:
(1)1.大鼠足容積檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn):AA模型建立之后,與空白組相比,足容積明顯增大(P<0.01);在施加艾灸之后,足容積明顯減小(P<0.01)。
2.經(jīng)局部血流指標(biāo)監(jiān)測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn):空白組的三項(xiàng)血流指標(biāo)均較平穩(wěn),呈緩慢下降的趨勢(shì);模型組三項(xiàng)血流指標(biāo)均高于空白組(P<0.01),呈較平穩(wěn)走勢(shì);模型+艾灸組的血流灌注量(PU)和移動(dòng)的血細(xì)胞的移動(dòng)速率(V)均高于模型組(P
5、<0.01),但移動(dòng)的血細(xì)胞的聚集程度(CMBC)有所下降,并呈先上升、后下降的特征性變化。
3.經(jīng)酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)、免疫組織化學(xué)(IH)、蛋白免疫印跡(WB)檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn):模型+艾灸組局部AT1表達(dá)量明顯低于模型組(P<0.01)。(2)1.經(jīng)局部血流指標(biāo)監(jiān)測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn):模型+AT1阻斷+艾灸組的三項(xiàng)血流指標(biāo)均有較大波動(dòng),明顯高于模型+艾灸組和模型+TRPV2阻斷+艾灸組(P<0.01),并呈明顯上升趨勢(shì),艾灸結(jié)束后
6、仍保持高灌注量狀態(tài);模型+TRPV2阻斷+艾灸組三項(xiàng)血流指標(biāo)均低于模灸組(P<0.01),波動(dòng)不明顯,趨勢(shì)較平穩(wěn)。
2.經(jīng)酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)、免疫組織化學(xué)(IH)、蛋白免疫印跡(WB)檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn):模型+AT1阻斷+艾灸組局部AT1的表達(dá)量均明顯低于模型+艾灸組(P<0.01),局部TRPV2的表達(dá)量均低于模型+艾灸組(P<0.05);模型+TRPV2阻斷+艾灸組血清AT1含量明顯高于模型+艾灸組(P<0.01),但局
7、部AT1表達(dá)量沒(méi)明顯差異(P>0.05),血清及灰度值顯示,TRPV2的表達(dá)量均低于模型+艾灸組(P<0.01),局部的蛋白相對(duì)表達(dá)量低于模型+艾灸組,但沒(méi)有明顯差異(P>0.05)。
結(jié)論:
1.艾灸可以有效改善“足三里”穴位局部血流,并呈先上升、后下降的特征性改變。
2.AT1、TRPV2均參與艾灸對(duì)“足三里”穴位局部血流的調(diào)控,主要表現(xiàn)為艾灸抑制AT1的表達(dá)和對(duì)TRPV2的激活。
3.阻斷A
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