SENP5基因在口腔鱗狀細胞癌中的表達及功能.pdf

1、目的：研究SENP5基因在口腔鱗狀細胞癌中的表達特點及臨床意義。在此基礎上，探討SENP5表達增加對口腔鱗狀細胞癌細胞增殖、凋亡、細胞周期、體外侵襲能力的影響。并進一步研究SENP5表達與口腔鱗狀細胞癌細胞分化的關系，并探討其分子機制。 方法： 1、首先用免疫組化檢測48例口腔鱗狀細胞癌組織以及癌旁組織中SENP5的表達，并將SENP5的表達情況與臨床病理指標間的相關性進行檢測，了解SENP5表達的臨床意義。 2

2、、分別采用甲基噻唑基四唑鹽比色技術和平板克隆形成實驗檢測過表達SENP5對Tca8113細胞增殖的影響；采用流式細胞儀的PI染色法、Annexin-V+PI染色法分別檢測過表達SENP5對Tca8113細胞周期和凋亡的影響；通過Transwell小室實驗，觀察過表達SENP5對Tca8113細胞體外遷移能力和侵襲能力的影響。 3、鈣誘導正常口腔粘膜上皮細胞和Tca8113細胞分化，觀察其過程中兩種細胞SENP5表達變化的不同。并

3、通過表達熒光蛋白標記的SENP5，觀察鈣誘導分化過程中Tca8113細胞SENP5蛋白胞內(nèi)定位的改變。通過過表達SENP5，檢測SENP5表達增加對Tca8113細胞分化的影響。 4、采用PKCα特異的siRNA下調(diào)Tca8113細胞中PKCα的表達，檢測PKCα表達變化對Tca8113細胞分化的影響，同時探討PKCα通路對SENP5表達的影響。 結果： 1、SENP5在口腔鱗狀細胞癌組織中的表達高于癌旁上皮，其

4、表達強度與口腔鱗狀細胞癌的分化程度相關，與預后等其它臨床和病理指標不相關；SENP5在口腔鱗狀細胞癌組織中主要定位于胞漿，在癌旁上皮中主要定位于胞核。 2、SENP5的高表達會抑制人口腔鱗癌細胞系Tca8113細胞的增殖能力；會使Tca8113細胞產(chǎn)生G0/G1期阻滯；會抑制Tca8113細胞的體外遷移能力和侵襲能力。 3、鈣誘導分化可以使正?？谇徽衬ど掀ぜ毎蠸ENP5表達增加，SENP5蛋白定位于核內(nèi)；鈣誘導分化也可

5、以使Tca8113細胞中SENP5表達增加，在鈣誘導作用下，Tca8113細胞中SENP5可移位至胞漿中；Tca8113細胞中SENP5的表達增加，可以誘導Tca8113細胞分化。 4、鈣誘導正常口腔粘膜上皮細胞和Tca8113細胞分化過程中，PKCα，會有表達下降；PKCα的表達下調(diào)，可導致Tca8113細胞的分化程度的增加，同時使鈣誘導Tca8113細胞分化的效應增加；在Tca8113細胞中，SENP5的表達與PKCα的表達

6、改變無關。 結論： SENP5與口腔鱗狀細胞癌的分化程度明顯相關。過表達SENP5可明顯的促進口腔鱗狀細胞癌細胞分化，除了使腫瘤細胞分化指標表達增加，還可使腫瘤細胞生長抑制，侵襲能力下降。與正?？谇徽衬ど掀ぜ毎蠸ENP5定位于胞核不同，在口腔鱗狀細胞癌細胞中，SENP5可表達于胞漿，而在鈣誘導分化的過程中，SENP5有進一步向胞漿移位的趨勢。鈣誘導分化可以使SENP5表達增加，但SENP5的表達增加與PKCα通路沒有