山羊FSH受體基因第10外顯子多態(tài)性及其與繁殖性狀關(guān)系的研究.pdf

1、實(shí)驗(yàn)選用波爾山羊44只，萊蕪黑山羊76只，波爾山羊與萊蕪黑山羊的雜交羊21只作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，將FSHR基因第10外顯子作為影響山羊產(chǎn)羔性狀的候選基因，對(duì)其第10外顯子進(jìn)行擴(kuò)增、測(cè)序、序列比較和PCR-SSCP檢測(cè)，探討了FSHR基因第10外顯子的遺傳特征。運(yùn)用最小二乘線(xiàn)性模型，對(duì)所發(fā)現(xiàn)的多態(tài)位點(diǎn)與山羊產(chǎn)羔性狀的關(guān)系進(jìn)行了分析。所得結(jié)果如下： 1、根據(jù)牛FSHR基因序列設(shè)計(jì)引物，以波爾山羊和萊蕪黑山羊基因組為模板，應(yīng)用PCR技術(shù)，克

2、隆和測(cè)定了FSHR基因第10外顯子序列，并與牛該區(qū)段序列進(jìn)行了比較分析。結(jié)果表明，PCR擴(kuò)增獲得的片斷為1643bp，其中三畜種FSHR基因第10外顯子長(zhǎng)均為1233bp。萊蕪黑山羊和波爾山羊的第10外顯子序列與牛該序列相比，同源性分別為97.49％和97.41％，分別在31和32處發(fā)生堿基突變，均引起10處氨基酸密碼改變。波爾山羊與萊蕪黑山羊相比，該序列同源性為99.60％，在3處發(fā)生堿基突變，其中+1184和+1365處突變引起氨基

3、酸密碼改變。 2、采用PCR-SSCP技術(shù)對(duì)山羊FSHR基因第10外顯子進(jìn)行多態(tài)性分析。結(jié)果表明：在該區(qū)所劃分的8個(gè)亞片段上，發(fā)現(xiàn)只有E10-1片段存在多態(tài)。在3個(gè)山羊群體中，波爾山羊中發(fā)現(xiàn)3種基因型(AA、BB、AB)，萊蕪黑山羊中發(fā)現(xiàn)了4種基因型(AA、BB、AB、DD)，在波×黑雜交群體中發(fā)現(xiàn)了4種基因型(AA、BB、AB、DD)。其中，AA基因型和A等位基因的頻率均為最高。對(duì)此片斷測(cè)序分析，發(fā)現(xiàn)分別在FSHR基因的145

4、27和14566處分別發(fā)生G→T及A→G堿基突變。 3、X2檢驗(yàn)表明，波爾山羊(x2=7.49)和萊蕪黑山羊(x2=11.07)，處于Hardy-Weinberg不平衡狀態(tài)(P＜0.05)；雜交山羊群體(X2=0.70)，處于Hardy-Weinberg平衡狀態(tài)(P＞0.05)。多態(tài)信息含量分析顯示，波爾山羊群體為低度多態(tài)，萊蕪黑山羊和雜交羊群體均為中度多態(tài)。 4、應(yīng)用SAS軟件對(duì)波爾山羊和萊蕪黑山羊群體不同基因型間的產(chǎn)