梔子苷預(yù)處理對(duì)家兔重癥急性胰腺炎防治作用.pdf

1、目的： 本實(shí)驗(yàn)采用梔子苷注射液對(duì)家兔進(jìn)行預(yù)處理，采用5％?；悄懰徕c溶液(Sodium taurocholate,TCA)逆行胰管注射建立重癥急性胰腺炎(Severe acutepancreatitis,S.AP)動(dòng)物模型，觀察梔子苷(Gardenia jasm inoides Ellis，GJE)對(duì)SAP的防治效果，并探討梔子苷的作用機(jī)制，為SAP的臨床治療提供理論依據(jù)。 方法： 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物處理和分組：采用SPF

2、日本大耳白兔24只(3-4月齡，雌雄各半，體重2.00-2.50kg)，按體重排序后，隨機(jī)等分為三組：假手術(shù)(SO)組(n=8)、重癥急性胰腺炎(SAP)組(n=8)、梔子苷預(yù)處理(GJE)組(n=8)。各組均以普通顆粒飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)一周。GJE組于造模前3天開(kāi)始給予腹腔注射10％的梔子苷注射液(0.1ml/100g)(3次/日)，SAP組家兔則與造模前3天給予腹腔注射等量的生理鹽水(0.1ml/100g)(3次/日)，SAP組、GJE

3、組及SO組于造模前12小時(shí)禁食，8小時(shí)禁水。10％的水合氯醛(3.5g/kg)耳緣靜脈注射麻醉。麻醉成功后，常規(guī)消毒、鋪巾，取腹壁正中切口入腹，解剖膽總管，用絲線(xiàn)懸吊其肝門(mén)端，用動(dòng)脈夾將膽總管出肝門(mén)端暫時(shí)阻斷，仔細(xì)觀察主胰管的走行方向及其在十二指腸開(kāi)口位置，在主胰管十二指腸對(duì)側(cè)腸壁以6號(hào)肝穿刺針穿刺進(jìn)入十二指腸，穿刺進(jìn)入主胰管后會(huì)有一定的露空感，然后拔出針芯，用外套管針繼續(xù)刺入主胰管，并固定，SAP組和GJE組家兔用微量泵以(0.05m

4、l/60S)的速度向胰管內(nèi)注射5％?；悄懰徕c溶液(0.1ml/100g)，注藥完畢后針芯保留5分鐘，見(jiàn)到胰腺明顯水腫后，去除絲線(xiàn)及動(dòng)脈夾，用0號(hào)絲線(xiàn)縫合腸壁，關(guān)腹；SO組開(kāi)腹后僅暴露胰腺并觸摸數(shù)次后關(guān)腹。造模成功后SO組、SAP組和GJE組分別于Oh、6h、12h和24h耳緣靜脈取血檢測(cè)各項(xiàng)指標(biāo)，于造模成功后24h各組家兔以10％的水合氯醛(3.5g/kg)耳緣靜脈注射麻醉后，開(kāi)腹后肉眼觀察各組家兔胰腺的病理改變，取胰腺組織用4％多聚甲

5、醛固定，常規(guī)脫水，包埋、切片、HE染色后用光學(xué)顯微鏡觀察。血清淀粉酶(amylase，AMY)和血清Ca2+含量在十堰市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科測(cè)定，采用ELISA法檢測(cè)血清TNF-α(tumor necrosisfactor-α)、IL-6(interleukin-6)的含量，具體方法參考試劑盒說(shuō)明書(shū)。 結(jié)果： 1.血清生化：SAP組、GJE組的血清淀粉酶(AMY)、血清Ca2+與SO組于6h、12h、24h比較，差異有極顯著

6、性(P<0.01)，GJE組血清淀粉酶(AMY)與SAP組于6h、12h、24h比較，差異有顯著性(P<0.05)；GJE組、SAP組與SO組于Oh相比較，差異無(wú)顯著性(P>0.05)；GJE組和SAP組組內(nèi)各時(shí)間點(diǎn)的AMY、Ca2+數(shù)值之間相比較，差異有顯著性(P<0.05)，SO組組內(nèi)各時(shí)間點(diǎn)的AMY、Ca2+數(shù)值之間相比較，差異無(wú)顯著性(P>0.05)。 2 .血清TNF-α、IL-6：SAP組、GJE組的TNF-α，IL

7、-6與SO組于6h、12h、24h比較，差異有極顯著性(P<0.01)，GJE組的TNF-α、IL-6與SAP組于6h、12h、24h比較，差異有顯著性(P<0.05)；GJE組、SAP組與SO組于Oh相比較，差異無(wú)顯著性(P>0.05)；GJE組和SAP組組內(nèi)各時(shí)間點(diǎn)的TNF-α、IL-6數(shù)值之間相比較，差異有顯著性(P<0.05)，SO組組內(nèi)各時(shí)間點(diǎn)的TNF-α、IL-6數(shù)值之間相比較，差異無(wú)顯著性(P>O．05)。 3.

8、肉眼觀察下各組家兔的胰腺改變：SO組開(kāi)腹后可見(jiàn)胰腺形態(tài)及外觀未見(jiàn)異常，而SAP組開(kāi)腹后可見(jiàn)胰腺出現(xiàn)片狀出血及黑色壞死灶，GJE組的胰腺的壞死程度較SAP組明顯輕。 4.光鏡下觀察胰腺組織HE染色后的病理改變：SO組家兔胰腺未見(jiàn)明顯病理改變，SAP組家兔胰腺可見(jiàn)多處出血壞死灶，大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)；GJE組家兔胰腺的病理改變較SAP組明顯輕。 結(jié)論： 1.在SAP的形成過(guò)程中，TNF-α、IL-6起著重要的介導(dǎo)作用，它

9、們?cè)谝认俳M織中活化，激活一系列細(xì)胞因子的作用，從而引起嚴(yán)重的炎癥反應(yīng)。 2.用梔子苷對(duì)家兔進(jìn)行預(yù)處理能抑制家兔血清淀粉酶(AMY)的升高以及血清Ca2+的降低，減輕胰腺細(xì)胞的鈣超載，從而減輕胰腺組織的損傷程度，保護(hù)胰腺細(xì)胞。 3.用梔子苷對(duì)家兔進(jìn)行預(yù)處理能抑制TNF-α、IL-6在家兔胰腺組織中的活化，從而下調(diào)胰腺組織中細(xì)胞因子的表達(dá)，對(duì)SAP的胰腺具有保護(hù)作用。 4.用梔子苷對(duì)家兔進(jìn)行預(yù)處理能夠減輕胰腺的損害的