多種腫瘤相關(guān)因子在宮頸癌變過(guò)程中的作用研究.pdf

1、子宮頸癌是常見(jiàn)的女性生殖器官惡性腫瘤，目前一致認(rèn)為宮頸癌的發(fā)生是由正常宮頸組織經(jīng)由宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)發(fā)展而來(lái)，是一較漫長(zhǎng)而復(fù)雜的過(guò)程。盡管已經(jīng)明確宮頸癌與HPV感染尤其與高危型HPV感染密切相關(guān)，但感染HPV即使高危型HPV后發(fā)展為宮頸癌的婦女為數(shù)并不多。文獻(xiàn)報(bào)道在宮頸癌變過(guò)程中，除HPV外尚有許多腫瘤相關(guān)因子參與其中，但其確切作用部位、作用機(jī)制等尚不清楚；擬或HPV感染是通過(guò)影響腫瘤相關(guān)因子而發(fā)揮其促宮頸癌變的作用等均不明了；此

2、外，文獻(xiàn)對(duì)腫瘤相關(guān)因子與宮頸癌變關(guān)系的報(bào)道結(jié)論并非一致，有關(guān)這些問(wèn)題有待進(jìn)一步深入研究。 既往的研究多是針對(duì)單個(gè)或幾個(gè)腫瘤相關(guān)因子進(jìn)行研究，采用研究方法不一，研究結(jié)果可比性差。組織芯片具有高通量，大樣本，省時(shí)快速，簡(jiǎn)便經(jīng)濟(jì)，結(jié)果可靠等優(yōu)點(diǎn)，可以在同一個(gè)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中對(duì)多種因子進(jìn)行平行研究，試驗(yàn)條件一致，實(shí)驗(yàn)誤差小。應(yīng)用組織芯片技術(shù)研究多種腫瘤相關(guān)因子在宮頸癌變過(guò)程中的作用，可使研究結(jié)果更可信和可比。 目的采用組織芯片技術(shù)研究

3、腫瘤相關(guān)因子Midkine、bcl-2、bax、cyclinD1、EGFR、Ki67、p63、p53、survivin、VEGF、MIF和p16在正常宮頸、CIN和宮頸癌組織中的表達(dá)，探討上述12種腫瘤相關(guān)因子在宮頸癌變過(guò)程不同階段(正常宮頸→CIN→宮頸鱗癌)的表達(dá)情況，以期發(fā)現(xiàn)各腫瘤相關(guān)因子在宮頸癌變過(guò)程中的作用，并進(jìn)一步分析各腫瘤相關(guān)因子的表達(dá)與宮頸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系。 方法選取2003年7月1日～2005年8月31日期

4、間中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院診治的18例CIN和41例宮頸癌(鱗癌31例，腺癌10例)作為研究對(duì)象。其中早期宮頸鱗癌組(FIG0分期Ⅰ-Ⅱa期)14例，進(jìn)展期宮頸鱗癌組(IIb以上)17例；按組織分化程度分為中高分化組14例，低分化組17例。另取同期因子宮肌瘤行子宮切除的正常宮頸組織10例作為正常對(duì)照組于同一條件下研究。 查閱患者的臨床資料，復(fù)閱病理組織切片，選擇病變具有代表性，符合本研究條件的存檔石蠟組織塊制作組織芯片。采用免疫組化

5、SP法或EnVision法檢測(cè)12種腫瘤相關(guān)因子Midkine、bcl-2、bax、cyclinD1、EGFR、Ki67、p63、p53、survivin、VEGF、MIF和p16在正常宮頸、CIN和宮頸癌組織中的表達(dá)。 應(yīng)用等級(jí)資料秩和檢驗(yàn)，分別對(duì)納入本研究的12個(gè)腫瘤相關(guān)因予在正常宮頸組和CIN組，CIN組和宮頸鱗癌組，正常宮頸組和宮頸鱗癌組的蛋白表達(dá)水平進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，初步篩選表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的因子。對(duì)初篩有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

6、的因子采用逐步logistic回歸分析(前進(jìn)法)方法進(jìn)一步篩選相關(guān)性更強(qiáng)的因子(納入標(biāo)準(zhǔn)0.05，排除標(biāo)準(zhǔn)0.10)，計(jì)算Logistic回歸模型的判別效率，大于75％時(shí)認(rèn)為理想。同樣路線分析12種腫瘤相關(guān)因子的表達(dá)與宮頸癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系。 結(jié)果1.腫瘤相關(guān)因子survivin、MIF、EGFR、Midkine、Ki67的表達(dá)在CIN組高于正常宮頸組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；用逐步logistic回歸的統(tǒng)計(jì)學(xué)方法再

7、次篩選顯示MIF、EGFR和survivin的表達(dá)差異更為相關(guān)。 2.腫瘤相關(guān)因子Bax、Bcl-2、EGFR、Ki67、Midkine、MIF、p16、survivin、VEGF的表達(dá)在宮頸鱗癌組高于CIN組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；再次篩選結(jié)果顯示P16和VEGF的表達(dá)差異更為相關(guān)，在宮頸鱗癌組顯著高于CIN組。 3.Bax、Bcl-2、Ki67、VEGF的表達(dá)在宮頸鱗癌進(jìn)展期高于早期宮頸鱗癌(P＜0.05

8、)；再次篩選顯示Bax、Bcl-2和ki67的相關(guān)性更強(qiáng)。 4.MIF、Survivin和VEGF的表達(dá)在宮頸低分化鱗癌高于中高分化，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，再次篩選顯示Survivin更為相關(guān)。 5.Bcl-2、EGFR、p16、VEGF和p63在宮頸鱗癌和宮頸腺癌的表達(dá)存在差異(P＜0.05)。進(jìn)一步篩選顯示p63和Bcl-2的在2組間的差異更為顯著，Bcl-2在宮頸腺癌中的表達(dá)顯著高于鱗癌，p63在宮頸腺

9、癌中不表達(dá)。 結(jié)論1.本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)survivin、MIF和EGFR的表達(dá)在CIN組明顯高于正常宮頸組；P16和VEGF的表達(dá)在宮頸鱗癌顯著高于CIN組。提示在正常宮頸組織向CIN轉(zhuǎn)變的過(guò)程中，survivin、MIF和EGFR發(fā)揮了重要的作用，而P16和Bax在CIN向?qū)m頸鱗癌轉(zhuǎn)化過(guò)程中起了促進(jìn)作用。 2.本研究結(jié)果顯示Bax、Ki67和Bcl-2在晚期宮頸鱗癌的表達(dá)高于早期宮頸鱗癌；Survivin和VEGF在低分

10、化的宮頸鱗癌的表達(dá)高于中、高分化的宮頸鱗癌，差異均有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。提示Bax、Ki67和Bcl-2可能參與了促進(jìn)宮頸鱗癌病變的進(jìn)展，而Survivin和VEGF可能與宮頸鱗癌表現(xiàn)出不同生物學(xué)特性有關(guān)。 3.本研究初步發(fā)現(xiàn)腫瘤相關(guān)因子Bcl-2和p63在宮頸鱗癌和宮頸腺癌中的表達(dá)差異顯著，Bc1-2在宮頸腺癌中的表達(dá)顯著高于鱗癌，p63在宮頸腺癌中不表達(dá)，Bcl-2和p63能否作為宮頸鱗癌與宮頸腺癌鑒別的分子標(biāo)記有待進(jìn)一步研究