Mcm2蛋白在賁門癌變過(guò)程中的表達(dá)及其預(yù)后意義.pdf

1、背景：
　　微型染色體維持蛋白(minichromosome maintenance proteins,MCMs)是一蛋白家族,至少包括Mcm2~7等六個(gè)結(jié)構(gòu)相關(guān)蛋白。目前研究認(rèn)為MCMs是真核細(xì)胞DNA復(fù)制前復(fù)合體的關(guān)鍵組分,是DNA復(fù)制所必需的。MCMs只存在于增殖細(xì)胞中,在分化細(xì)胞和靜止細(xì)胞中含量減少或消失,因此可以作為增殖細(xì)胞的特異標(biāo)記。而腫瘤組織與正常組織細(xì)胞相比除形態(tài)學(xué)上的特征以外,在功能狀態(tài)上表現(xiàn)為控制細(xì)胞增殖的機(jī)制

2、失調(diào),具有很強(qiáng)的增殖能力。因此MCMs可以作為腫瘤細(xì)胞的特異標(biāo)志和一些腫瘤病變的診斷工具。一系列包括宮頸、皮膚、食管、肺、腎臟等正常組織和腫瘤組織的Mcm2表達(dá)研究提示Mcm2可以作為一些腫瘤的細(xì)胞標(biāo)記物,但Mcm2在賁門組織中的表達(dá)還缺乏系統(tǒng)的研究。
　　目的：
　　本研究檢測(cè) Mcm2蛋白在正常賁門、單純性增生、非典型增生粘膜組織和癌組織中的表達(dá)規(guī)律及其與賁門癌臨床病理特征的關(guān)系,并與PCNA及Ki-67比較,探究Mcm

3、2蛋白作為新的增殖指標(biāo)在賁門癌變過(guò)程中的早期診斷意義和對(duì)賁門癌患者預(yù)后評(píng)估中的作用。
　　材料：
　　1.賁門癌標(biāo)本:180例賁門癌標(biāo)本來(lái)自2000-2007年間汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院病理學(xué)教研室標(biāo)本庫(kù)。其中133例有完整隨訪資料,5年及以上隨訪期的患者有126例,7例患者隨訪期少于5年,5年隨訪率94.7％。
　　2.賁門粘膜標(biāo)本:賁門癌旁粘膜47例,包括17例單純性增生粘膜組織、30例非典型增生粘膜組織;另取10例非賁門疾

4、病死亡尸體解剖病例正常賁門粘膜組織作為對(duì)照。
　　方法：
　　1.免疫組織化學(xué)染色
　　Envision Labelled Peroxidase System(ELPS)二步法檢測(cè)Mcm2、Ki-67以及PCNA蛋白在賁門石蠟組織中的表達(dá)。
　　2.圖像分析法
　　應(yīng)用Leica IM50圖像采集系統(tǒng)和Image-Pro Plus6.0圖像分析系統(tǒng)對(duì)染色結(jié)果分析,計(jì)算每張切片的標(biāo)記指數(shù)( labelling

5、 index, LI)。
　　結(jié)果：
　　1. Mcm2蛋白在賁門粘膜組織和癌組織中的表達(dá):在正常的賁門、單純性增生粘膜上皮組織中,Mcm2蛋白表達(dá)局限于賁門腺體底部的下1/3至1/2部分的增生細(xì)胞,而間質(zhì)細(xì)胞和靠近胃腔表面的細(xì)胞未見(jiàn)染色。在非典型增生粘膜和癌組織中,Mcm2在整個(gè)上皮大量表達(dá)。從正?！鷨渭冃栽錾堑湫驮錾?Ki-67、Mcm2和PCNA的LI均逐漸增高,且其差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。其中在癌

6、和非典型增生中,Mcm2的LI明顯高于其他二者,且其差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);在正常賁門和單純性增生組織中,PCNA的標(biāo)記指數(shù)高于Ki-67和Mcm2,但差別沒(méi)有統(tǒng)計(jì)意義(P>0.05)。
　　2. Mcm2在賁門粘膜非典型增生診斷的評(píng)價(jià):敏感度為90.0%,特異度為63.0%,準(zhǔn)確度為77.2%,陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為73.0%,陰性預(yù)測(cè)值為87.0%,優(yōu)于傳統(tǒng)的增殖指標(biāo)PCNA和Ki-67,提示其對(duì)于癌前病變及早期癌的早期診斷

7、意義。
　　3. Mcm2蛋白的表達(dá)與賁門癌臨床病理特征之間的關(guān)系:Mcm2、Ki-67和PCNA均與年齡、性別、腫瘤大小、病理類型無(wú)顯著相關(guān),而三者與TNM分期、有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)(P<0.05)。在各級(jí)賁門管狀腺癌標(biāo)本中, Mcm2的LI隨著分化級(jí)別的降低而上升,各組之間的差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。Ki-67的LI也隨著分化級(jí)別的降低而上升,但是各組之間的差別沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),PCNA的LI在中分化和低

8、分化賁門癌的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。在高、中、低分化賁門管狀腺癌組內(nèi),Mcm2、Ki67和PCNA的差別均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.000)。
　　4. Mcm2、PCNA和Ki-67表達(dá)對(duì)賁門癌預(yù)后的影響:Kaplan-Meier生存率曲線和Lon-rank test分析發(fā)現(xiàn),三者的低表達(dá)組患者(LI≤50%)的總生存率和無(wú)瘤生存率分別高于其相應(yīng)高表達(dá)組患者(LI>50%),提示Mcm2與Ki-67、PCNA的表達(dá)在賁門

9、癌術(shù)后的侵襲、轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)中可能發(fā)揮了重要作用。對(duì)可能影響賁門癌預(yù)后的性別、年齡、腫瘤最長(zhǎng)徑、是否化療、浸潤(rùn)深度(T分期)、淋巴轉(zhuǎn)移(N分期)及Mcm2、Ki-67和PCNA在賁門癌中的表達(dá)情況等多個(gè)因素進(jìn)行Cox’s Regression分析,消除各因素間的相互影響。多因素 COX回歸分析結(jié)果顯示,臨床 TNM分期(P=0.000,OR=2.028)、Mcm2蛋白的表達(dá)(P=0.012,OR=3.421)、性別(P=0.014,OR=1

10、.901)和是否化療(P=0.018, OR=0.499)均為賁門癌術(shù)后生存期獨(dú)立的預(yù)后指標(biāo),臨床TNM分期晚、Mcm2蛋白在賁門癌中的高表達(dá)、沒(méi)有術(shù)后輔助化療的男性患者的術(shù)后生存期短。
　　結(jié)論：
　　1.Mcm2蛋白作為新的增殖指標(biāo)對(duì)癌前病變及早期癌的具有早期診斷意義,且優(yōu)于 PCNA和Ki-67。
　　2.Mcm2對(duì)非典型增生診斷的敏感度、特異度、準(zhǔn)確度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值及陰性預(yù)測(cè)值均高于PCNA和Ki-67。