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1、目的:通過(guò)尾靜脈注射脂多糖(LPS)建立大鼠流產(chǎn)的模型,用黃體酮及脂多糖拮抗劑LPS-RS干預(yù),計(jì)算胚胎吸收率,并檢測(cè)流產(chǎn)大鼠蛻膜組織中IL-1β、TNF-α因子蛋白表達(dá)情況,從而探討感染性流產(chǎn)的發(fā)病機(jī)制及黃體酮和LPS-RS對(duì)感染引起流產(chǎn)的作用。
方法:將雌雄大鼠合籠,發(fā)現(xiàn)陰栓日為妊娠第0天,孕鼠隨機(jī)分組,建立五組大鼠模型,實(shí)驗(yàn)一組為對(duì)照組,于孕7天尾靜脈注射磷酸緩沖液(PBS)1ml/只,實(shí)驗(yàn)二組于孕7天尾靜脈注射LPS1
2、ml/只,實(shí)驗(yàn)三組于孕6-11天黃體酮肌注0.2ml/只,孕7天尾靜脈注射LPS1ml/只,實(shí)驗(yàn)四組于孕7天尾靜脈注射LPS-RS1ml/只后1小時(shí)再次尾靜脈注射LPS1ml/只,實(shí)驗(yàn)五組于孕6-11天加黃體酮肌注0.2ml/只,孕7天尾靜脈注射LPS-RS1ml/只后1小時(shí)再次尾靜脈注射LPS1ml/只,分組即為對(duì)照組、LPS組(流產(chǎn)組)、LPS+黃體酮組,LPS+LPS-RS組,LPS+黃體酮+LPS-RS組,并于孕13天處死,取流
3、產(chǎn)大鼠的蛻膜組織,計(jì)算胚胎吸收率,比較各組之間的差異,用western blot方法檢測(cè)大鼠蛻膜組織IL-1β、TNF-α蛋白表達(dá)情況。
結(jié)果:五組胚胎吸收率分別為6.58%、24.79%、16.30%。9.89%、13.48%,實(shí)驗(yàn)二組(流產(chǎn)組)胚胎吸收率明顯高于實(shí)驗(yàn)一組(對(duì)照組),成功建立大鼠流產(chǎn)模型,實(shí)驗(yàn)三組、實(shí)驗(yàn)四組、實(shí)驗(yàn)五組與實(shí)驗(yàn)一組比較,胚胎吸收率均高于實(shí)驗(yàn)一組,但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,實(shí)驗(yàn)四組、實(shí)驗(yàn)五組與實(shí)驗(yàn)二組比較,胚
4、胎吸收率均低于實(shí)驗(yàn)二組,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,實(shí)驗(yàn)三組、實(shí)驗(yàn)四組、實(shí)驗(yàn)五組胚胎吸收率情況,兩兩比較無(wú)明顯差異,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Western blot方法檢測(cè)大鼠蛻膜組織的IL-1β蛋白表達(dá)情況的比較:實(shí)驗(yàn)一組、實(shí)驗(yàn)五組與實(shí)驗(yàn)二組(流產(chǎn)組)比較,實(shí)驗(yàn)二組大鼠蛻膜組織IL-1β表達(dá)上升,P<0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,實(shí)驗(yàn)三組、實(shí)驗(yàn)四組、實(shí)驗(yàn)五組間兩兩比較大鼠蛻膜組織IL-1β表達(dá)未見(jiàn)明顯差異,P>0.05,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Western blot方法檢
5、測(cè)大鼠蛻膜組織的TNF-α表達(dá)情況:實(shí)驗(yàn)一組、實(shí)驗(yàn)五組與實(shí)驗(yàn)二組(流產(chǎn)組)比較,實(shí)驗(yàn)二組大鼠蛻膜組織TNF-α表達(dá)上升,P<0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,實(shí)驗(yàn)三組、實(shí)驗(yàn)四組、實(shí)驗(yàn)五組間兩兩比較大鼠蛻膜組織TNF-α表達(dá)未見(jiàn)明顯差異,P>0.05,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)論:脂多糖可引起妊娠大鼠流產(chǎn),用LPS-RS及黃體酮處理后能一定程度上拮抗LPS導(dǎo)致的胚胎吸收。流產(chǎn)大鼠蛻膜組織中IL-1β、TNF-α蛋白表達(dá)增加,而黃體酮與LPS-RS
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