缺血后處理對腦缺血再灌注大鼠IL-1β和TNF-α表達(dá)的影響.pdf

1、第一部分，目的:建立大鼠局灶性腦缺血后處理(ischemicpostconditioning,IP)模型,探討IP對局灶性腦缺血再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)損傷發(fā)揮腦保護(hù)作用的最佳方案。
　　 方法:成年健康雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠60只,隨機(jī)分為6組:假手術(shù)組(sham)組、缺血再灌注(I/R)組、IP-15s、IP-30s、IP-45s及IP-60s亞組,每組大鼠各10只。局

2、灶性腦缺血再灌注模型采用線栓法阻塞大腦中動(dòng)脈(middlecerebralarteryocclusion,MCAO)2h,拔出線栓恢復(fù)再灌注24h,IP各組方法為在MCAO2h后持續(xù)再灌注前,分別給予3個(gè)循環(huán)的15s/15s、30s/30s、45s/45s、60s/60s再灌注/缺血。各組大鼠于再灌注24h行神經(jīng)功能評分,并測定細(xì)胞凋亡及腦梗死體積,確定IP發(fā)揮腦保護(hù)作用的最佳方案。
　　 結(jié)果:成功建立線栓法MCAO缺血2h再

3、灌注24h模型。I/R組大鼠可見神經(jīng)功能缺失、缺血側(cè)大腦半球梗死及凋亡細(xì)胞大量表達(dá)。與I/R組相比,IP-15s、IP-30s、IP-45s組大鼠神經(jīng)功能評分均改善(P＜0.05),其中IP-15s組神經(jīng)功能評分低于IP-30s和IP-45s組(P＜0.05);IP-15s、IP-30s、IP-45s組較I/R組腦梗死體積及凋亡細(xì)胞計(jì)數(shù)顯著顯著降低,特別以IP-15s組明顯(P＜0.05)。IP-60s組與I/R組相比無顯著性差異(P＞

4、0.05)。
　　 結(jié)論:改良線栓法制備腦缺血耐受模型切實(shí)可行;IP可減輕腦缺血再灌注損傷,發(fā)揮腦保護(hù)作用;作用效果有時(shí)間窗限制,最佳方式為再灌注15s/缺血15s,反復(fù)3次。
　　 第二部分，目的:探討IP對局灶性腦缺血再灌注大鼠白細(xì)胞介素1-β(interleukin-1β,IL-1β)和腫瘤壞死因子-α(tumornecrosisfactol-α,TNF-α)表達(dá)的影響,從而闡明IP的腦保護(hù)作用機(jī)制。
　　

5、 方法:將成年健康雄性SD大鼠110只隨機(jī)分為假手術(shù)(sham)組(n=10)、缺血再灌注(I/R)組(n=50)和IP組(n=50),根據(jù)再灌注時(shí)間后兩組又分為6h、12h、24h、48h、72h五個(gè)亞組。采用大腦中動(dòng)脈線栓法建立局灶性腦缺血再灌注模型,IP方法為在大腦中動(dòng)脈阻閉2h后實(shí)施再灌注15s/缺血15s,反復(fù)3次。對各組進(jìn)行神經(jīng)功能學(xué)評分,TTC染色測定腦梗死體積,免疫組化法檢測腦組織IL-1β和TNF-α蛋白的表達(dá),原位雜

6、交法檢測IL-1β和TNF-αmRNA的表達(dá)。
　　 結(jié)果:(1)組間比較:I/R組大鼠可見神經(jīng)功能缺失及缺血側(cè)大腦半球梗死:與I/R組相比,IP組大鼠神經(jīng)行為學(xué)評分改善,腦梗死體積明顯減少(P＜0.05)。IL-1β、TNF-α蛋白及tuRNA在I/R組額頂葉大量表達(dá),IP組各時(shí)間點(diǎn)IL-1β、TNF-α蛋白及mRNA表達(dá)均明顯低于I/R組(P＜0.05)。(2)組內(nèi)比較:I/R組IL-1β、TNF-α蛋白及mRNA表達(dá)6h開