2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題（含答案詳解+作文范文）_第1頁(yè)
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1、目的：制備HMGB1單克隆抗體并建立HMGB1的競(jìng)爭(zhēng)ELISA測(cè)定方法。 方法：用bis(sulfosuccinimidyl)suberate制備 HMGB1-BSA 偶聯(lián)物(HMGB1-BSA)和HRP 標(biāo)記的HMGB1(HMGB1-HRP)；以完全佐劑乳化的HMGB1-BSA免疫 Balh/c小鼠；用50％PEG 使小鼠脾細(xì)胞與 Sp2/0 細(xì)胞融合；用有限稀釋法克隆雜交瘤細(xì)胞；用DE52離子交換色層析柱純化單克隆抗體；用靜

2、脈注射鏈尿菌素法建立大鼠糖尿病模型。 結(jié)果：在120個(gè)孔內(nèi)，發(fā)現(xiàn)17個(gè)孔內(nèi)有分泌HMGB1 單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞生長(zhǎng)。對(duì)其中A6-Ⅲ孔內(nèi)雜交瘤細(xì)胞用有限稀釋法克隆化，共獲得7株分泌HMGB1 特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞株。用其中一株雜交瘤(HMGB1-C1 株)制備了純化 HMGB1 單克隆抗體。利用 HMGB1-BSA 和 HMGB1-HRP 建立的競(jìng)爭(zhēng)ELISA的測(cè)定范圍為 1～320ng/mL，回收率為97～106％，變異系

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