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文檔簡介
1、目的:通過觀察小鼠胚胎植入期CAR(Coxsakie virus and Adenovirus receptor)在子宮內(nèi)膜中表達(dá)的變化規(guī)律,研究CAR在胚胎植入過程中的作用,以指導(dǎo)臨床提高輔助生殖技術(shù)的成功率。
方法:隨機(jī)將受孕雌性昆明小鼠分為4組(n=7):dpc(days post coitus)2.5,dpc4.5,dpc6.5及dpc8.5。取孕鼠子宮行Real time RT-PCR及免疫組織化學(xué)檢測(cè)CAR基因水平
2、以及蛋白水平表達(dá)量。闡述小鼠胚胎著床時(shí)期子宮內(nèi)膜CAR在表達(dá)量及表達(dá)部位的變化規(guī)律。Real time PCR結(jié)果用2-△△CT方法分析。采用IPP(Image Pro-Plus 6.0 software)軟件對(duì)免疫組化結(jié)果進(jìn)行半定量分析。統(tǒng)計(jì)方法為單因素方差分析ANOVA,P<0.05記為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
結(jié)果:我們發(fā)現(xiàn)在小鼠胚胎植入期(dpc4.5天、dpc6.5天)子宮內(nèi)膜CAR的mRNA和蛋白表達(dá)量明顯低于非著床期(dp
3、c2.5天、dpc8.5天)。Dpc2.5天時(shí)CAR的蛋白表達(dá)量最高,dpc4.5,6.5時(shí)下降,dpc8.5時(shí)CAR表達(dá)量再次上升。IPP分析免疫組織化學(xué)染色密度顯示著床期CAR染色密度明顯減小,可達(dá)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。著床期內(nèi)膜組織化學(xué)切片顯示在同一切面著床位部位染色密度較非著床位點(diǎn)偏低。
結(jié)論:胚胎著床期CAR在mRNA及蛋白水平表達(dá)下調(diào),導(dǎo)致子宮腔上皮緊密連接功能不全,促進(jìn)滋養(yǎng)細(xì)胞的侵入。植入窗關(guān)閉后CAR表達(dá)
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