骨肉瘤中Survivin、VEGF的表達(dá)及其與細(xì)胞增殖及預(yù)后的相關(guān)分析.pdf

1、目的： Survivin基因是一種結(jié)構(gòu)獨(dú)特的調(diào)亡抑制基因，具有抑制細(xì)胞調(diào)亡和調(diào)控細(xì)胞分裂的雙重作用，參與了血管的形成，與多種惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和預(yù)后密切相關(guān)。血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)是最重要的促血管生成調(diào)控因子，具有誘導(dǎo)血管生成和增加微血管通透性的作用，與腫瘤血管形成關(guān)系密切。細(xì)胞增殖核抗原PCNA是反應(yīng)細(xì)胞增殖狀態(tài)的最好指標(biāo)。本研究采用免疫組織化學(xué)SP法檢測骨肉瘤組織中的Survivin蛋白、血管內(nèi)皮生長因子VEGF

2、、微血管密度MVD與細(xì)胞增殖核抗原PCNA的表達(dá)情況，探討上述基因在骨肉瘤發(fā)生、發(fā)展、侵襲轉(zhuǎn)移中的價值，闡明Survivin、VEGF基因在骨肉瘤細(xì)胞凋亡、細(xì)胞增殖、血管新生等方面的相互作用及關(guān)系，并從分子水平對骨肉瘤提供重要的預(yù)后信息。 方法： 應(yīng)用免疫組織化學(xué)SP法對46例原發(fā)性骨肉瘤組織、12例骨軟骨瘤組織中Survivin蛋白、血管內(nèi)皮生長因子VEGF、微血管密度MVD與細(xì)胞增殖核抗原PCNA的表達(dá)水平進(jìn)行檢測。

3、分析檢測結(jié)果與骨肉瘤臨床病理和生物學(xué)行為的關(guān)系，探討Survivin、VEGF與MVD、PCNA在骨肉瘤組織中表達(dá)的相互關(guān)系。在38例隨訪資料完整的病例中，分析Survivin、VEGF的表達(dá)與骨肉瘤術(shù)后復(fù)發(fā)、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的關(guān)系；按Survivin、VEGF 基因是否表達(dá)比較兩組術(shù)后生存率及生存曲線的差異。將影響骨肉瘤病人預(yù)后的可能因素進(jìn)行Cox多因素回歸分析，尋找骨肉瘤獨(dú)立的預(yù)后因素。 統(tǒng)計(jì)采用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)分析軟件，兩組間

4、均數(shù)的比較采用t檢驗(yàn)，兩樣本率的比較采用X<'2>檢驗(yàn)或Fisher精確概率法；相關(guān)性分析采用Spearman等級相關(guān)分析；Kaplan-Meier法繪制生存曲線，運(yùn)用Cox比例風(fēng)險模型進(jìn)行多因素分析；取P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果： 共有46例患者進(jìn)入研究和隨訪觀察。其中男性28例，女性18例，年齡7～62歲，平均年齡19.8歲。發(fā)病部位：膝關(guān)節(jié)周圍為主38例(股骨下段26例，脛骨上段12例)，肱骨6例，其他

5、部位2例。按腫瘤Enneking分期，Ⅰ期5例，ⅡA期12例，ⅡB期23例，Ⅲ期6例。所有病例均進(jìn)行術(shù)后五年隨訪，其中38 例隨訪資料完整。 Survivin蛋白表達(dá)：46例骨肉瘤組織中Survivin蛋白表達(dá)陽性率為63.1％(29/46)，對照組12例骨軟骨瘤組織中未見表達(dá)(P<0.05)；Survivin陽性表達(dá)與患者年齡、性別、腫瘤部位、大小、病理分型無明顯關(guān)系；與Enneking外科分期相關(guān)，在Ⅰ-ⅡA與ⅡB-Ⅲ之間，

6、表達(dá)率差異明顯(P<0.05)。Survivin陽性表達(dá)組PCNA-LI為69.6±10.2％，而Survivin陰性表達(dá)組PCNA-LI為57.5±11.4％，有顯著性差異(P<0.05)；Survivin陽性表達(dá)組MVD值為21.4±8.2，而Survivin陰性表達(dá)組MVD值為14.2±5.4，有顯著性差異(P<0.05)。 VEGF蛋白表達(dá)：46 例骨肉瘤組織中VEGF蛋白表達(dá)陽性率為65.8％(31/46)，對照組12例骨軟骨

7、瘤組織中未見表達(dá)(P<0.05)；VEGF 陽性表達(dá)與患者年齡、性別、腫瘤部位、大小、病理分型及Enneking外科分期無明顯關(guān)系(P>0.05)。VEGF陽性表達(dá)組PCNA-LI為56.6±20.2％，而VEGF陰性表達(dá)組PCNA-LI為15.9±5.1％，有顯著性差異(P<0.05)；VEGF陽性表達(dá)組MVD值為31.1±8.2，而VEGF陰性表達(dá)組MVD值為13.9±5.0，有顯著性差異。(P<0.05)。 24 例術(shù)后復(fù)

8、發(fā)者骨肉瘤組織中的Survivin、VEGF陽性表達(dá)率分別為 75％(18/24)，83.3％(20/24)；MVD值為45.8±12.7；無復(fù)發(fā)者14例Survivin、VEGF陽性表達(dá)率為35.7％(5/14)，42.8％(6/14)；MVD值為30.3±8.63；在術(shù)后復(fù)發(fā)的骨肉瘤組織中Survivin、VEGF表達(dá)均有顯著性差異(P<0.05)；而MVD表達(dá)無顯著性差異(P>0.05)。 26 例有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移骨肉瘤中，Su

9、rvivin、VEGF陽性表達(dá)率分別為 80.7％(21/26)，76.9％(20/26)；MVD值為44.8±13.2；而不伴有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的12例骨肉瘤中，Survivin、VEGF陽性表達(dá)率分別為33.3％(4/12)，25％(3/12)；MVD值為22.6±11.2；均有顯著性差異(P<0.05)本組骨肉瘤組織中Survivin蛋白表達(dá)陽性的病人中VEGF的表達(dá)顯著高于Survivin蛋白表達(dá)陰性的病人，29例Survivin陽性者

10、VEGF表達(dá)陽性24例，占82.8％，17例Survivin陰性者VEGF表達(dá)陽性7例，占41.2％，差異有顯著性(P<0.05)。等級相關(guān)分析顯示，骨肉瘤組織中Survivin與VEGF表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.612，P<0.05)。 Survivin陽性患者五年存活率為24％(6 /25)，低于Survivin陰性組五年生存率61.5％(8 /13)，生存曲線比較顯示兩組有顯著性差異(P<0.05)；VEGF陽性患者五年存活率

11、為36.0％(9 /25)，低于VEGF陰性組五年生存率53.9％(7 /13)，生存曲線比較顯示兩組無顯著性差異(P>0.05)。 Survivin與VEGF同時陽性表達(dá)組與二者同時陰性表達(dá)組患者的平均生存時間分別為17.3個月，24.9個月。Survivin與VEGF同時陽性表達(dá)的骨肉瘤患者生存期明顯小于同時陰性表達(dá)組，有顯著性差異(P<0.05)。 多因素分析顯示，骨肉瘤Enneking分期，Survivin表達(dá)為

12、骨肉瘤獨(dú)立的預(yù)后因素。 結(jié)論： 1．Survivin蛋白特異性的表達(dá)于骨肉瘤中，且表達(dá)水平與腫瘤術(shù)后復(fù)發(fā)、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，提示其在骨肉瘤的發(fā)生發(fā)展中有重要的作用。Survivin可以作為一種新的骨肉瘤診斷標(biāo)志物。 2． VEGF與MVD顯著相關(guān)，提示其與骨肉瘤血管生成密切相關(guān)，對骨肉瘤的生長和浸潤轉(zhuǎn)移有促進(jìn)作用；它可以用來衡量細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移能力一個指標(biāo)。 3．骨肉瘤組織中Survivin與VEGF表達(dá)呈正