依托泊苷靜脈注射亞微乳劑的研究.pdf

1、靜脈注射亞微乳劑以其安全低毒、生物相容性好的特點可以作為親脂性抗癌藥物的優(yōu)良載體。本研究的目的是運用高壓均質技術和膜載藥原理，制備一種高效、穩(wěn)定的依托泊苷靜脈注射亞微乳劑(ESE)，對其制備處方工藝和理化性質進行研究，探討藥物在亞微乳劑中的分布情況，并比較依托泊苷溶液劑和乳劑引起的刺激性和大鼠體內藥物動力學行為。
　　 確立了依托泊苷的體外分析方法。采用HPLC法測定ESE含量及降解產物，預測了可能的降解產物和途徑，分析方法可行

2、，重現(xiàn)性好，準確度高。依托泊苷在不同介質中的溶解度結果表明其屬于油水均難溶藥物，且未見pH依賴性；通過計算得到依托泊苷的油相/水相分配系數(shù)為1.2。測得依托泊苷的油水分配系數(shù)約為9.78，屬于親脂性藥物。
　　 依托泊苷在緩沖鹽中的水解動力學研究表明，80℃下藥物在pH<2和pH>8的水溶液中迅速降解，在pH3.5～5.3范圍最穩(wěn)定；依托泊苷的降解符合一級反應動力學，且隨著緩沖鹽濃度的增加而加速，通過外推計算得到依托泊苷在不含緩

3、沖鹽水溶液中各pH值的logk2.5、logk3.5、logk4.5、logk5.3、logk6.5和logk7.5分別為-2.15、-3.14、-3.59、-3.39、-2.45和-1.53。
　　 確定了ESE的最終處方及制備工藝為：按質量百分比，油相組成為依托泊苷0.1％、LCT和MCT各10％、豆磷脂1.8％、油酸0.05％，水相組成為甘油2.5％、Tween800.1％、F680.2％、加注射用水至全量；制備初乳的油相

4、和水相溫度分別為80℃和70℃，均質前調節(jié)初乳pH值至5.5，高壓均質參數(shù)為800 bar壓力循環(huán)6次，滅菌條件為100℃水浴旋轉滅菌30 min。分別采用激光散射法和超濾離心法測定其粒徑、zeta-電位和包封率，測得三批ESE平均粒徑180.1±52.2 nm，zeta-電位-24.8 mV，包封率91.0％。
　　 低溫長期留樣和加速試驗考察ESE物理化學穩(wěn)定性，采用恒溫加速試驗考察溫度、pH值和藥物濃度對ESE化學穩(wěn)定性的

5、影響。依托泊苷在ESE中的降解符合一級反應動力學。4℃長期留樣9個月物理穩(wěn)定性無顯著變化。加速試驗預測4℃有效期(T0.9)約為427天；在80℃下，ESE在pH>8時降解迅速，降解半衰期(t1/2)約為1.61 h，而在pH3.85～6.15范圍內具有最大化學穩(wěn)定性，降解半衰期(t1/2)分別為42.99和32.71天，與水溶液相比，在各pH值條件下ESE化學穩(wěn)定性較藥物水溶液顯著提高，采用數(shù)學模型推測其原因主要為絕大部分藥物主要分布

6、于亞微乳劑的界面膜上，減少了與水溶液的直接接觸；依托泊苷在ESE中的降解具有濃度依賴性，logk0.02、logk0.1、logk0.5和logk1分別為-7.19、-6.29、-5.74和-5.45。采用超濾離心法進行體外釋放研究，結果顯示由于無限稀釋效應ESE在pH7.4的PBS中，1h內基本釋放(>90％)。
　　 以依托泊苷溶液劑為參比制劑，測定ESE大鼠體內的藥物動力學特征，結果表明，ESE和溶液劑在大鼠體內藥物動力學

7、曲線均符合雙隔室模型，AUC0-t分別為(18.30±8.74)和(19.32±6.45)μg·h·mL-1，MRT分別為(1.46±0.32)和(1.71±0.52)h；依托泊苷在大鼠組織中的分布濃度由大到小的順序依次是：肝、心臟、肺、腎、脾，腦組織中未檢測出藥物存在。二者RES uptake無顯著差異，說明ESE無肝脾靶向性，結果ESE除了在心臟中的分布略有增高外，未改變藥物在大鼠血漿中的藥動學行為和組織中的分布。安全性試驗表明，E