復(fù)康平防治神經(jīng)根型頸椎病的主要藥效學(xué)研究及機(jī)理初探.pdf

1、神經(jīng)根型頸椎病(CSR)是神經(jīng)根受各種因素侵襲損傷而導(dǎo)致其支配區(qū)域感覺(jué)、運(yùn)動(dòng)及反射障礙而引發(fā)的以疼痛為主要臨床表現(xiàn)的一種疾病。流行病學(xué)調(diào)查顯示，頸椎病在我國(guó)成人中的患病率大約為3.8％～17.6％。按現(xiàn)有人口保守推算，至少有5000萬(wàn)至1億人正在受到頸椎病的折磨。神經(jīng)根型頸椎病是頸椎病中發(fā)病率最高的一種類(lèi)型，約占其總發(fā)病率的60％～70％。醫(yī)學(xué)界最早關(guān)于頸椎病的概念，大多源于神經(jīng)根型，可謂頸椎病之代表。一般而言，頸椎病是中老年人的多發(fā)病

2、；然而令人擔(dān)憂的是，由于伏案工作時(shí)間及種類(lèi)的增加，電腦的普及，私家車(chē)的大量增多及高枕、睡軟床等諸多因素，近年來(lái)頸椎病的發(fā)病正呈現(xiàn)出年輕化的趨勢(shì)。因此，深入探討其發(fā)病機(jī)理具有重要的醫(yī)學(xué)及社會(huì)意義。 復(fù)康平(FuKangPing)由桂枝、黃芪、杜仲、續(xù)斷四味中藥組成，具益氣溫經(jīng)、和營(yíng)通痹、強(qiáng)筋健骨之功效。中醫(yī)認(rèn)為，神經(jīng)根型頸椎病的病機(jī)多責(zé)之于肝腎漸虧，兼氣虛血脈不暢，以致頸骨不健，血營(yíng)不足，在此基礎(chǔ)上，若持續(xù)勞損或感受風(fēng)寒濕邪，即易

3、引起骨質(zhì)退化而成此“痹證”。該病以氣虛、肝腎不足為本，風(fēng)寒濕痹阻血脈為標(biāo)。治則當(dāng)以溫通血脈為先，扶正健骨為要。方中以桂枝為君藥，性溫、味辛甘，功擅溫經(jīng)散寒、通利血脈。更重要的是，它是上肢的引經(jīng)藥，對(duì)上肢頸肩痛最宜，正如天師所曰：“手之麻木，乃氣虛而風(fēng)濕中之，必須用手經(jīng)之藥引入手中，而祛風(fēng)除濕之藥始能有效，否則，亦甚無(wú)益……得桂枝，始能入于手經(jīng)也”。黃芪為臣，性微溫、味甘，具補(bǔ)氣升陽(yáng)、益衛(wèi)固表之作用，與桂枝合用共奏益氣溫經(jīng)、和營(yíng)通痹之效。

4、輔以杜仲、續(xù)斷補(bǔ)益肝腎，強(qiáng)筋健骨以治其本。諸藥合奏，氣旺血充，營(yíng)衛(wèi)調(diào)和，經(jīng)脈通暢，筋骨得健，痹痛得除。 本研究結(jié)合目前神經(jīng)根型頸椎病的研究現(xiàn)狀，采用神經(jīng)電生理學(xué)方法、酶聯(lián)免疫分析、放射免疫測(cè)定、免疫組織化學(xué)等手段，同時(shí)結(jié)合抗炎、鎮(zhèn)痛藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)，分析探討了復(fù)康平對(duì)神經(jīng)根型頸椎病的防治作用及可能機(jī)制。 第一部分復(fù)康平防治神經(jīng)根型頸椎病的主要藥效學(xué)研究 1復(fù)康平對(duì)頸神經(jīng)根炎模型大鼠體感誘發(fā)電位、脊髓病理形態(tài)學(xué)及痛閾的影

5、響 目的：研究復(fù)康平對(duì)頸神經(jīng)根炎模型大鼠一般行為活動(dòng)、體感誘發(fā)電位、脊髓病理形態(tài)學(xué)及機(jī)械性壓迫所致痛覺(jué)敏感的改善作用。方法：采用椎管插線法(以頸6、7神經(jīng)根為中心在大鼠椎管內(nèi)放置漁線，壓迫神經(jīng)根致局部炎癥)制作頸神經(jīng)根炎大鼠模型。觀察造模后1個(gè)月內(nèi)大鼠的一般行為活動(dòng)；采用神經(jīng)電生理學(xué)技術(shù)測(cè)定造模3、7、14天后大鼠正中神經(jīng)體感誘發(fā)電位的脊髓及皮層傳導(dǎo)時(shí)間；HE染色觀察造模后第7、14天大鼠脊髓組織的病理形態(tài)學(xué)；采用快藍(lán)染色法測(cè)定

6、造模7、14天后大鼠脊髓外側(cè)索神經(jīng)纖維脫髓鞘致空泡變性的面積；采用痛閾檢測(cè)法測(cè)定造模第1、7、14天大鼠的痛閾值。結(jié)果：頸神經(jīng)根炎模型建立后，大鼠表現(xiàn)為：動(dòng)作遲緩、精神不活躍；手術(shù)側(cè)上肢緊貼胸前，不能觸地，肘、腕關(guān)節(jié)不能活動(dòng)，各趾間緊縮；手術(shù)側(cè)上肢無(wú)法抓握食物；用棉簽等物輕觸頸神經(jīng)分布區(qū)，大鼠身體不斷躲閃，同時(shí)持續(xù)不斷的嘶叫；造模9天左右，上述現(xiàn)象開(kāi)始逐漸減弱并最終消失。SEP檢測(cè)結(jié)果顯示，造模后大鼠正中神經(jīng)體感誘發(fā)電位的脊髓及皮層神經(jīng)

7、傳導(dǎo)時(shí)間明顯延長(zhǎng)，同假手術(shù)組相比有顯著性差異，這種神經(jīng)傳導(dǎo)時(shí)間的延長(zhǎng)現(xiàn)象可維持到造模14天后。HE染色結(jié)果顯示，造模7天后，脊髓神經(jīng)元細(xì)胞數(shù)目減少；痛閾檢測(cè)結(jié)果顯示，造模后大鼠痛閾值明顯降低，出現(xiàn)了痛覺(jué)敏感現(xiàn)象，同假手術(shù)組相比有顯著性差異，這種痛覺(jué)敏感現(xiàn)象可維持到造模14天后。研究過(guò)程中，我們發(fā)現(xiàn)，本模型癥狀(動(dòng)物一般行為障礙，脊髓及神經(jīng)結(jié)構(gòu)、功能改變，痛覺(jué)敏感等)出現(xiàn)早，3天即可看到明顯的改變；持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)，可以持續(xù)到造模14天后。同時(shí)

8、壓線部位脊髓及神經(jīng)根局部組織中炎癥細(xì)胞因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)增多(參見(jiàn)后文)，這些細(xì)胞因子的出現(xiàn)可能是導(dǎo)致癥狀出現(xiàn)的直接原因。經(jīng)藥物治療后，復(fù)康平組大鼠手術(shù)側(cè)肢體力量的恢復(fù)明顯優(yōu)于同期模型組大鼠；手術(shù)側(cè)肘關(guān)節(jié)及足由可輕輕觸地逐漸恢復(fù)至可完全著地，直至活動(dòng)比較自如所需時(shí)間較模型組大鼠明顯縮短；手術(shù)側(cè)上肢抓握能力及肢體活動(dòng)的協(xié)調(diào)性明顯優(yōu)于同期模型組大鼠，且抓握食物后不易掉落；表明復(fù)康平能顯著改善頸神經(jīng)根炎模型大鼠的一般行為

9、障礙。SEP檢測(cè)結(jié)果顯示，造模3天后，復(fù)康平3g/kg、6g/kg均可明顯縮短模型大鼠的脊髓及皮層傳導(dǎo)時(shí)間；造模7天后，復(fù)康平6g/kg可明顯縮短模型大鼠的脊髓傳導(dǎo)時(shí)間，復(fù)康平3g/kg、6g/kg可不同程度地縮短模型大鼠的皮層傳導(dǎo)時(shí)間；造模14天后，復(fù)康平6g/kg可明顯縮短模型大鼠的皮層傳導(dǎo)時(shí)間；表明復(fù)康平能夠縮短由于脊髓及神經(jīng)根損傷引起的脊髓及皮層傳導(dǎo)時(shí)間的延長(zhǎng)。HE染色結(jié)果顯示，造模7天后，復(fù)康平組脊髓神經(jīng)元數(shù)目較模型組多；小膠

10、質(zhì)細(xì)胞的增生受到抑制；脊髓外側(cè)索及后索神經(jīng)纖維空泡變性程度較模型組減輕。造模14天后，復(fù)康平組小膠質(zhì)細(xì)胞的增生受到顯著抑制；星形膠質(zhì)細(xì)胞的反應(yīng)性增生亦受到明顯抑制，膠質(zhì)瘢痕形成減少；脊髓外側(cè)索及后索神經(jīng)纖維空泡變性程度較模型組明顯減輕。脊髓外側(cè)索空泡面積測(cè)定結(jié)果顯示，1.5g/kg、3g/kg、6g/kg復(fù)康平可顯著縮小造模7、14天后大鼠脊髓外側(cè)索空泡變性的面積。痛閾檢測(cè)結(jié)果顯示，3g/kg、6g/kg復(fù)康平可明顯提高造模第7、14天

11、大鼠的痛閾值。結(jié)論：復(fù)康平可明顯改善頸神經(jīng)根炎模型大鼠的一般行為障礙，提高感覺(jué)神經(jīng)傳導(dǎo)功能，顯著減輕脊髓及神經(jīng)纖維的病理性損傷，并能改善其痛覺(jué)敏感狀態(tài)。 2復(fù)康平對(duì)坐骨神經(jīng)結(jié)扎壓迫模型大鼠肢體運(yùn)動(dòng)功能及痛閾的影響 目的：研究復(fù)康平對(duì)坐骨神經(jīng)結(jié)扎壓迫模型大鼠一般行為活動(dòng)、肢體運(yùn)動(dòng)功能及機(jī)械性壓迫所致痛覺(jué)敏感的改善作用。方法：參照Bennett方法制作大鼠急性/亞急性坐骨神經(jīng)結(jié)扎壓迫模型。觀察造模后1個(gè)月內(nèi)大鼠的一般行為活動(dòng)

12、；采用改良的Rivlin斜板法測(cè)定造模前及造模后第1、2、3、4、5、6、7、10天大鼠斜板實(shí)驗(yàn)的臨界角度值；采用痛閾檢測(cè)法測(cè)定造模第7天大鼠的痛閾值。結(jié)論：復(fù)康平可明顯改善坐骨神經(jīng)結(jié)扎壓迫模型大鼠的一般行為障礙，對(duì)坐骨神經(jīng)結(jié)扎壓迫模型大鼠肢體運(yùn)動(dòng)功能的恢復(fù)有顯著的促進(jìn)作用，并能改善其痛覺(jué)敏感狀態(tài)。 3復(fù)康平抗炎作用研究 目的：研究復(fù)康平對(duì)急性、亞急性及慢性非特異性炎癥的影響，以明確其一般抗炎作用。方法：采用二甲苯致小鼠

13、耳腫脹、角叉菜膠致大鼠足跖腫脹及大鼠棉球肉芽腫模型考察復(fù)康平的抗炎作用。結(jié)論：復(fù)康平對(duì)急性、亞急性及慢性非特異性炎癥均有明顯的抑制作用。 4復(fù)康平鎮(zhèn)痛作用研究 目的：研究復(fù)康平對(duì)化學(xué)及機(jī)械刺激所致疼痛的影響，以明確其鎮(zhèn)痛作用。方法：采用醋酸致小鼠扭體法疼痛模型，測(cè)定其扭體反應(yīng)次數(shù)；采用痛閾檢測(cè)法測(cè)定正常大鼠的壓力痛閾值。結(jié)果：復(fù)康平3g/kg、6g/kg可顯著減少0.6％冰醋酸所致的小鼠扭體反應(yīng)次數(shù)；復(fù)康平1.5g/kg

14、、3g/kg、6g/kg可顯著提高正常大鼠的壓力痛閾值。結(jié)論：復(fù)康平對(duì)化學(xué)及機(jī)械刺激引起的疼痛均有明顯的抑制作用。 第二部分復(fù)康平防治神經(jīng)根型頸椎病的機(jī)理初探 1復(fù)康平對(duì)頸神經(jīng)根炎模型大鼠脊髓及神經(jīng)根組織IL-1β、IL-6、TNF-α及IL-10含量的影響 目的：研究復(fù)康平對(duì)頸神經(jīng)根炎模型大鼠造模3天后脊髓及神經(jīng)根組織中白介素1β(IL-1β)、白介素6(IL-6)、腫瘤壞死因子α(TNF-α)及白介素10(I

15、L-10)含量的影響。 2復(fù)康平對(duì)頸神經(jīng)根炎模型大鼠血漿PGE2含量的影響 目的：研究復(fù)康平對(duì)頸神經(jīng)根炎模型大鼠造模7、14天后血漿前列腺素E2(PGE2)含量的影響。方法：采用椎管插線法制作頸神經(jīng)根炎大鼠模型，造模7、14天后，大鼠頸總動(dòng)脈取血，分離血漿，以放射免疫法測(cè)定其血漿中PGE2的含量。結(jié)果：造模后大鼠血漿PGE2含量顯著升高，復(fù)康平6g/kg可顯著降低造模7、14天后頸神經(jīng)根炎模型大鼠血漿PGE2的水平，3g

16、/kg復(fù)康平可明顯降低造模7天后頸神經(jīng)根炎模型大鼠血漿PGE2的水平。結(jié)論：復(fù)康平可明顯降低頸神經(jīng)根炎模型大鼠血漿PGE2的異常升高。 3復(fù)康平對(duì)頸神經(jīng)根炎模型大鼠脊髓灰質(zhì)COX-2表達(dá)的影響 目的：研究復(fù)康平對(duì)頸神經(jīng)根炎模型大鼠造模7、14天后脊髓灰質(zhì)環(huán)氧合酶2(COX-2)蛋白表達(dá)的影響。方法：采用椎管插線法制作頸神經(jīng)根炎大鼠模型，造模7、14天后，大鼠壓線部位脊髓組織石蠟切片，以免疫組織化學(xué)方法觀察脊髓灰質(zhì)COX-

17、2蛋白的表達(dá)。結(jié)論：復(fù)康平可抑制神經(jīng)根炎模型大鼠脊髓灰質(zhì)COX-2蛋白的異常表達(dá)及激活。 綜上所述：復(fù)康平對(duì)脊髓及神經(jīng)根受壓迫損傷后神經(jīng)系統(tǒng)感覺(jué)及運(yùn)動(dòng)功能障礙、脊髓組織炎癥反應(yīng)及空泡變性、痛覺(jué)敏感性增強(qiáng)以及脊髓及神經(jīng)根受損后局部組織炎性介質(zhì)的合成、釋放等具有較為明顯的對(duì)抗作用；同時(shí)具有顯著的抗炎、鎮(zhèn)痛作用；進(jìn)一步的研究表明，通過(guò)重建炎性細(xì)胞因子&抗炎細(xì)胞因子的動(dòng)態(tài)平衡及抑制環(huán)氧合酶2的表達(dá)進(jìn)而下調(diào)前列腺素E2的含量可能是其治療神