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文檔簡介
1、石斛為名貴中草藥,石斛多糖是其主要的有效成分。本文以藥用石斛之一的細(xì)莖石斛為材料,以從其莖斷提取的多糖成分DMP4a-1為研究對象,對其結(jié)構(gòu)特性作了進一步的分析;同時主要以巨噬細(xì)胞為模型研究了細(xì)莖石斛多糖DMP4a-1的免疫調(diào)節(jié)活性,主要實驗結(jié)果如下: 細(xì)莖石斛酸性多糖DMP4a-1為灰黃色絮狀固體,紫外分析推測其為蛋白多糖;經(jīng)高效液相凝膠滲透色譜分析,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線測得其分子量Mw3049;用其三甲基硅醚衍生物進行氣相色譜分析主要由
2、葡萄糖,甘露糖,鼠李糖,阿拉伯糖和半乳糖組成,其分子摩爾比為:2.873:2.850:1.762:1.279:1;紅外光譜圖中895cm-1的吸收峰顯示該多糖為β-D吡喃糖;高碘酸氧化分析表明糖鏈結(jié)構(gòu)中存在1→4,1→3及1→6糖苷鍵其摩爾數(shù)比為1.194:2.430:1。由以上結(jié)果表明細(xì)莖石斛多糖DMP4a-1結(jié)構(gòu)特性較為復(fù)雜,是一種β(1→3)-D吡喃雜多糖。 細(xì)莖石斛酸性多糖DMP4a-1作用于對數(shù)生長期的巨噬細(xì)胞RAW264
3、.7后,用雙抗夾心ELISA法檢測細(xì)胞培養(yǎng)上清中的TNFα濃度,發(fā)現(xiàn)細(xì)胞迅速分泌TNFα,隨刺激時間的延長,TNFα量亦明顯增加(P<0.01);進一步的濃度梯度實驗證明在12.μg/ml時TNFα分泌量即有顯著升高(P<0.01),隨著DMP4a-1的刺激濃度升高,TNFα量亦隨著增加,說明其對巨噬細(xì)胞的刺激作用具有濃度依賴效應(yīng)。同時,DMP4a-1激活RAW264.7細(xì)胞后,亦可誘導(dǎo)細(xì)胞NO生成量迅速增加,并且其生成量也和DMP4a
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