血漿可溶性選擇素在兒童ITP中的作用研究.pdf

1、特發(fā)性血小板減少性紫癜(idiopathic thrombocytopenic purpura，ITP)又稱之為免疫性血小板減少性紫癜(immune thrombocytopenic purpura)是小兒最常見的出血性疾病之一。發(fā)病率約為5/10萬，絕大多數(shù)急性病例可以自愈，但仍有7％～28％轉(zhuǎn)為慢性，這其中有部分患兒需要作脾切除手術(shù)才能得以緩解。通常認(rèn)為ITP的發(fā)病機(jī)制是外周血中的血小板通過膜表面的糖蛋白抗原識別循環(huán)中的血小板自身抗

2、體并被致敏，隨后被脾、肝、骨髓中有活性的網(wǎng)狀內(nèi)皮組織系統(tǒng)過早從外周血中清除而使其壽命縮短，外周血中血小板濃度下降。除了吞噬作用外，還有包括補(bǔ)體激活、T淋巴細(xì)胞直接殺細(xì)胞作用在內(nèi)的破壞機(jī)制。脾臟是自體反應(yīng)的T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞相互作用、激活和自體反應(yīng)的抗血小板抗體產(chǎn)生的部位，大多數(shù)ITP病人血小板破壞的主要部位在脾臟。然而，致敏機(jī)體內(nèi)循環(huán)中血小板如何進(jìn)入脾索，又如何被巨噬細(xì)胞識別并清除，尚未闡明。二十世紀(jì)九十年代以來國內(nèi)外學(xué)者先后發(fā)現(xiàn)I

3、TP患者血漿P-選擇素、E-選擇素水平增高并且活化的內(nèi)皮細(xì)胞可能是ITP病人體內(nèi)可溶性P-選擇素的主要來源，這提示ITP時脾竇血管內(nèi)皮細(xì)胞活化程度增高，脾臟可能是病理狀態(tài)下可溶性E-選擇素、可溶性P-選擇素的主要來源。其作用可能是增強(qiáng)了脾竇血管內(nèi)皮細(xì)胞對循環(huán)中淋巴細(xì)胞和血小板的黏附功能，從而使淋巴細(xì)胞和血小板進(jìn)入脾竇，并進(jìn)一步激活淋巴細(xì)胞，引發(fā)對血小板的自身免疫破壞。 本實(shí)驗(yàn)擬通過檢測ITP患兒血漿可溶性L-選擇素、可溶性E-選

4、擇素、可溶性P-選擇素的濃度變化，研究三者與血小板破壞的相關(guān)性，探討其對ITP發(fā)病的意義。從而為臨床判斷病情、觀察療效、確定脾切除手術(shù)指征、評估預(yù)后提供理論依據(jù)。 材料與方法 1．對象：ITP患兒共40例，其中AITP組25例，CITP組15例，AITP于治療前，CITP于隨診血小板計數(shù)未恢復(fù)正常時抽取外周靜脈血2ml．進(jìn)行檢驗(yàn)。對照組15例為年齡、性別相近的健康體檢兒童。 2．外周血漿的制備：取外周靜脈血2ml

5、加入裝有0.2m11％EDTA抗凝劑的離心管中，混勻抗凝，2000r/min離心10分鐘，用移液器將上清液移入．Appendolf管中，-80℃冰箱凍存待測。 3．血漿可溶性選擇素的檢測：以血漿為標(biāo)本，用雙抗夾心ELISA法遵照試劑盒說明書進(jìn)行檢測。 4．統(tǒng)計學(xué)分析：采用統(tǒng)計學(xué)分析軟件包SPSS14.0進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，統(tǒng)計數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)、單因素方差分析和直線相關(guān)分析。 結(jié)果

6、 1．血漿sE濃度比較：ITP組患兒血漿sE濃度為2.03±0.80 ng/ml，其中AITP組為2.18±0.87 ng/ml，CITP組為1.79±0.62 ng/ml，對照組兒童為1.12±0.52 ng/ml；ITP組患兒血漿sE濃度明顯高于對照組，差異有顯著性(P=0.000)，其中AITP組與對照組(P=0.000)，CITP組與對照組(P=0.009)，血漿sE濃度均明顯升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。AITP組雖然高于Cl

7、TP組，但無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。 2．血漿sP濃度比較：ITP組患兒血漿sP濃度(610.11±200.67 ng/ml)低于對照組(843.62±256.80 ng/ml)，差異有顯著性(P=0.001)。ITP組患兒血漿sP/Plt濃度為33.00±11.74 ng/ml，其中AITP組為35.52±13.50 ng/ml，ClTP組為28.79±6.41 ng/ml，對照組為3.40±1.12 ng/ml；ITP組

8、患兒血漿sP/Plt濃度明顯高于對照組，差異有顯著性意義(P=0.000)，AITP組與CITP組血漿sP/Plt濃度均高于對照組10倍左右，其中AITP組又明顯高于CITP組。AITP組與對照組(P=0-000)，CITP與對照組(P=0.000)，AITP組與CITP組(P=0.04)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。 3.血漿sL濃度比較：ITP組患兒血漿sL濃度為3882.68±2107.31 ng/ml，其中AITP組為4044.04±23

9、34.48 ng/ml，CITP組為3613.76±1704.16 ng/ml，對照組為3396.04±2096.46 ng/ml；ITP組患兒血漿sL濃度稍高于對照組，差異無顯著性(P=0.448)，AITP組與CITP組血漿sL濃度均高于對照組，AITP組又高于CITP組，但各組之間均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。 4.血漿sP與血小板計數(shù)的相關(guān)性分析：ITP組患兒血漿sP與外周血小板計數(shù)成顯著正相關(guān)(r=0.540，p=0

10、.000)；AITP組患兒血漿sP與外周血小板計數(shù)成正相關(guān)(r=0.654，p=0.000)；然而，CITP組患兒血漿sP與外周血小板計數(shù)無相關(guān)性(r=0.196，p=0.483)。 5.血漿sP/Plt與外周血小板計數(shù)的相關(guān)性分析：ITP組患兒血漿sP/Plt與外周血小板計數(shù)成負(fù)相關(guān)(r=-0.532，p=0.000)：AITP組患兒血漿sP/Plt與外周血小板計數(shù)成負(fù)相關(guān)(r=-0.464，p=0.019)：CITP組患兒血

11、漿sP/Plt與外周血小板計數(shù)成顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.834，p=0.000)。 6.血漿sE與外周血小板計數(shù)的相關(guān)性分析：ITP組患兒血漿sE與外周血小板計數(shù)無相關(guān)性(r=-0.104，p=0.525)。 7.血漿sL與外周血小板計數(shù)的相關(guān)性分析：ITP組患兒血漿sL與外周血小板計數(shù)無相關(guān)性(r=0.028，p=0.865)。 結(jié)論 1.sP、sE與兒童ITP的發(fā)病有關(guān)，表現(xiàn)為脾竇血管內(nèi)皮細(xì)胞活化程度增

12、高，sP、sE的表達(dá)增高，致使T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞在脾竇被激活，導(dǎo)致機(jī)體細(xì)胞免疫和體液免疫紊亂。 2.脾竇血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)P-選擇素增高，導(dǎo)致血液循環(huán)中致敏血小板在脾臟被俘獲，并進(jìn)一步被破壞，導(dǎo)致血小板減少。 3．AITP組血漿sP/Plt濃度高于CITP組，提示AITP組脾臟竇內(nèi)皮細(xì)胞活化程度較CITP組高，因而血小板破壞程度較重。 4．本實(shí)驗(yàn)闡明了選擇素與ITP發(fā)病的意義，但其具體機(jī)制仍有待進(jìn)一步深入探討研