阿爾茨海默癥模型細(xì)胞的鈣信號(hào)研究.pdf

1、　　本論文以轉(zhuǎn)基因AD模型細(xì)胞為材料，利用激光共聚焦掃描顯微鏡成像技術(shù)，系統(tǒng)地研究了AD模型細(xì)胞的鈣信號(hào)紊亂情況。本文的主要內(nèi)容及結(jié)果如下：一、對(duì)神經(jīng)瘤細(xì)胞和海馬神經(jīng)元進(jìn)行形態(tài)和功能研究，對(duì)神經(jīng)瘤細(xì)胞作為AD鈣信號(hào)研究模型細(xì)胞的可行性進(jìn)行了初步驗(yàn)證。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果得知，在合適濃度的細(xì)胞分化誘導(dǎo)劑視黃酸(RetinoicAcid，RA)誘導(dǎo)下，N2a(NeuroblastomaCell，Mouse)細(xì)胞向與神經(jīng)元類似的形態(tài)分化，可以形成類似于

2、神經(jīng)元的軸突，甚至神經(jīng)元間的網(wǎng)絡(luò)狀結(jié)構(gòu)；實(shí)驗(yàn)中還發(fā)現(xiàn)有的誘導(dǎo)細(xì)胞形態(tài)非常接近于星型膠質(zhì)細(xì)胞。在神經(jīng)科學(xué)的研究中，對(duì)生理和病理狀態(tài)下Ca2+波動(dòng)研究是探討許多疾病機(jī)理的重要途徑之一。而細(xì)胞的K+極化刺激誘發(fā)的Ca2+波動(dòng)是一個(gè)經(jīng)典實(shí)驗(yàn)。K+極化刺激誘發(fā)的Ca2+波動(dòng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，N2a細(xì)胞和海馬神經(jīng)元的Ca2+波動(dòng)非常相似。此實(shí)驗(yàn)結(jié)果也進(jìn)一步表明：用N2a細(xì)胞代替原代海馬神經(jīng)元進(jìn)行AD致病機(jī)理的Ca2+信號(hào)的功能性研究是可行的。N2a細(xì)胞

3、的可傳代性、可誘導(dǎo)分化性和與神經(jīng)元鈣信號(hào)的相似性可以滿足AD鈣信號(hào)研究的要求。二、APP695基因突變對(duì)細(xì)胞鈣信號(hào)的影響。三、天然Aβ對(duì)細(xì)胞鈣信號(hào)的影響。本文首次利用形態(tài)和鈣信號(hào)與神經(jīng)元接近的AD模型細(xì)胞研究了APP695基因突變對(duì)AD神經(jīng)細(xì)胞鈣信號(hào)的影響；證明了天然產(chǎn)生的Aβ在AD細(xì)胞鈣信號(hào)紊亂中的作用。本文的結(jié)果支持Aβ在AD發(fā)病機(jī)理中核心作用的理論。本文工作也顯示：活體細(xì)胞鈣離子成像技術(shù)可以作為AD治療藥物高通量篩選一個(gè)初步的平臺(tái)