消退素D1在博來霉素肺纖維化小鼠中的抗纖維化作用及機制研究.pdf

1、目的:
　　探討RvD1對C57BL/6小鼠博來霉素肺纖維化的作用和機制。在體模型，觀察RvD1對小鼠肺組織炎癥、膠原纖維形成的影響，并對纖維化相關通路進行研究。在細胞水平，TGF-β1刺激肺原代成纖維細胞增殖，探討RvD1對TGF-β1引起的增殖、膠原纖維表達及其下游傳導通路的影響。
　　方法:
　　將C57BL/6小鼠隨機分為對照組、模型組及RvD1組。模型組以BLM氣管內(nèi)注入建立;對照組氣管內(nèi)注入相同劑量的生理鹽

2、水;RvD1組，氣管內(nèi)注入BLM后于4d、7d、14d腹腔注射RvD1進行干預治療，第21天將小鼠處死取肺組織進行檢測。HE染色觀察肺組織炎癥程度;ELASA檢測細胞因子TGF-β1的表達，Masson染色半定量檢測膠原蛋白沉積，免疫組化（SP法）檢測α-SMA，CollagenⅠ(ColⅠ)以及Fibronectin(FN)含量，Western Blot進一步定量檢測α-SMA、ColⅠ及FN的表達，最后對纖維化相關通路AKT、ERK

3、、P38MAPK及JNK通路進行檢測。
　　體外實驗，TGF-β1刺激C57BL/6小鼠原代肺成纖維細胞增殖，用RvD1進行干預。CCK-8檢測細胞增殖，Western Blot檢測細胞α-SMA、ColⅠ及FN的表達，最后細胞上進一步用Western Blot對相關通路AKT、ERK、P38MAPK及JNK進行檢測。
　　結果:
　　1.動物模型中，RvD1能夠明顯抑制肺部的炎癥反應，降低TGF-β1的表達水平;此外

4、，RvD1還能夠抑制細胞外基質(zhì)沉積，減少α-SMA、ColⅠ及FN的表達，從而抑制BLM引起的纖維化。RvD1還能夠抑制相關通路AKT、ERK、P38MAPK及JNK的磷酸化。
　　2.體外實驗中，TGF-β1可刺激原代成纖維細胞增殖，RvD1能夠抑制此增殖反應。同時，RvD1還能夠抑制TGF-β1引起的膠原纖維形成，抑制AKT、ERK、P38MAPK及JNK通路的磷酸化。
　　結論:
　　RvD1可抑制炎癥、抑制膠原