TNF-α與IL-10對(duì)由酒精聯(lián)合四氯化碳誘導(dǎo)的肝性腦病小鼠海馬神經(jīng)元的影響.pdf

1、目的：
　　探討TNF-α與 IL-10對(duì)由酒精聯(lián)合四氯化碳誘導(dǎo)的肝性腦病小鼠海馬神經(jīng)元的影響。
　　方法：
　　實(shí)驗(yàn)分為正常組（10只野生型小鼠）、模型組1（10只野生型小鼠）、模型組2（10只純合型IL-10基因敲除小鼠）、模型組3（10只純合型TNF-α基因敲除小鼠）4組。以逐步遞增酒精濃度的方法使酒精成為模型組小鼠唯一飲水來(lái)源，每周2次腹腔注射四氯化碳（前2周0.25ul/g，后4周0.5ul/g），共注射6周

2、。通過(guò)對(duì)小鼠一般生物狀態(tài)的觀察，血AST、ALT的生化測(cè)定，肝臟HE染色觀察，以及Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)檢測(cè)來(lái)判斷模型的制備是否成功。再利用PSA染色、透射電鏡、GRP78免疫組化技術(shù)，觀察各模型組小鼠海馬組織形態(tài)學(xué)及超微結(jié)構(gòu)的改變。
　　結(jié)果：
　　（1）模型組小鼠飲食量后期較正常組減少，體重亦較正常組減輕；正常組小鼠精神狀態(tài)正常，行動(dòng)靈活；模型組小鼠有輕度倦怠、反應(yīng)遲鈍現(xiàn)象，以模型組2明顯，所有小鼠均未出現(xiàn)抽搐、共濟(jì)失調(diào)

3、、昏迷等中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀。
　　(2)各模型組小鼠逃避潛伏期均較正常組（19.5±4.84s）延長(zhǎng)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；模型組2（44.36±11.05s）逃避潛伏期較模型組1延長(zhǎng)，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；模型組3（32.92±11.82s）逃避潛伏期較模型組1（45.44±8.73s）短，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；各模型組小鼠穿臺(tái)次數(shù)與正常組（6.10±1.19times/60s）比較時(shí)均減少，除

4、模型組3（5.0±1.155 times/60s）外，其他兩個(gè)模型組與正常組比較時(shí)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；模型組2（2.80±1.317 times/60s）穿臺(tái)次數(shù)較模型組1減少，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；模型組3較模型組1（3.20±1.549 times/60s）穿臺(tái)次數(shù)顯著增多（P<0.05）。
　?。?）造模6周時(shí)，各模型組小鼠ALT、AST值較正常組明顯升高(P<0.05)。
　　(4)3組

5、模型組小鼠都出現(xiàn)了不同程度的炎細(xì)胞浸潤(rùn)等肝損傷病理改變。
　　(5)模型組2小鼠海馬神經(jīng)元形態(tài)學(xué)及超微結(jié)構(gòu)損傷較模型組1明顯，模型組3神經(jīng)元形態(tài)學(xué)及超微結(jié)構(gòu)損傷較模型組1輕，但差異不明顯。
　　結(jié)論：
　?。?）酒精聯(lián)合CCl4誘導(dǎo)小鼠肝性腦病的模型制備成功；
　?。?）IL-10基因敲除后，肝性腦病小鼠海馬組織損傷加重，提示IL-10可能在肝性腦病的發(fā)病過(guò)程中對(duì)海馬神經(jīng)元起保護(hù)作用；
　?。?）TNF-α