四氯化碳長期暴露對小鼠海馬錐體細胞樹突棘和突觸的影響.pdf

1、四氯化碳(carbontetrachloride，CCl4)暴露會造成肝臟、腎臟損傷以及神經(jīng)系統(tǒng)抑制等，嚴重危害人類健康。目前CCl4毒性研究主要集中在其肝腎毒性及其相關(guān)機制，但是，關(guān)于CCl4對神經(jīng)系統(tǒng)損傷的研究遠不夠深入，尤其對于在活體觀察CCl4長期暴露對神經(jīng)細胞形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能的影響鮮見報道。海馬與學(xué)習(xí)記憶密切相關(guān)，是神經(jīng)毒理學(xué)研究的理想靶器官。樹突棘和突觸是神經(jīng)元的主要功能結(jié)構(gòu)，對毒物等外源性神經(jīng)毒素反應(yīng)敏感，因此，其結(jié)構(gòu)和功能

2、的病理改變常作為毒物損傷以及某些神經(jīng)系統(tǒng)疾病功能障礙的成因。
　　目的：
　　建立CCl4長期暴露模型，模擬CCl4長期接觸毒性，觀察小鼠行為學(xué)改變以及CCl4長期暴露對小鼠海馬錐體細胞樹突棘和突觸的影響。
　　方法：
　　建立CCl4長期暴露小鼠模型，利用Morris水迷宮觀察CCl4暴露后小鼠學(xué)習(xí)記憶能力改變，利用DiI-散射標記、免疫組織化學(xué)、透射電鏡等方法觀察CCl4長期暴露后小鼠海馬錐體細胞形態(tài)和結(jié)構(gòu)改

3、變。
　　結(jié)果：
　　(1)利用Morris水迷宮觀察CCl4長期暴露對小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響。在獲得性訓(xùn)練和對位訓(xùn)練中，雖然CCl4高組劑量組和低劑量組小鼠潛伏期平均值差異未達到顯著性水平（P＞0.05），探查實驗和對位探查實驗中兩組小鼠在中環(huán)停留的距離與總路程之比的差異也未達到顯著性水平（P＞0.05），但在搜索策略的比較中對照組小鼠空間搜索策略百分比明顯高于CCl4組，且達到顯著性差異(P＜0.05)，對照組重復(fù)環(huán)繞策

4、略百分比明顯高于正常組小鼠且達到顯著性差異(P＜0.01)?？梢缘贸鼋Y(jié)論CCl4干預(yù)小鼠與對照組小鼠相比，學(xué)習(xí)與記憶能力有顯著性差異，低于對照組小鼠。
　　(2)利用DiI-散射標記神經(jīng)元的方法對各實驗組小鼠海馬錐體細胞進行標記，激光共聚焦顯微鏡觀察樹突棘病理變化，結(jié)果表明CCl4長期暴露能夠誘導(dǎo)小鼠海馬錐體細胞樹突棘密度降低（數(shù)量減少）、長度增加，并具有劑量相關(guān)性及長時程增強(long-termpotentiation，LTP)

5、效應(yīng)。
　　(3)利用免疫熒光技術(shù)，synaptophysin標記對照組與藥物組（低劑量組和高劑量組）小鼠，結(jié)果顯示藥物組海馬突觸前體的synaptophysin熒光陽性顆粒數(shù)量隨著CCl4長期暴露劑量升高而減少，提示CCl4長期暴露引起突觸減少，并呈劑量相關(guān)性。
　　(4)利用透射電鏡對對照組和藥物組小鼠突觸超微結(jié)構(gòu)進行觀察，結(jié)果顯示:突觸結(jié)構(gòu)出現(xiàn)一定改變，與對照組相比，藥物兩組均出現(xiàn)突觸小泡減少，突觸間隙模糊。