益氣養(yǎng)陰降濁法對CVB-,3m-重復(fù)感染致病毒性心肌炎心室重構(gòu)影響的研究.pdf

1、目的：探討重復(fù)感染致病毒性心肌炎心室重構(gòu)的發(fā)生機(jī)制，MMPs家族在心肌炎心室重構(gòu)過程的作用及與相關(guān)的細(xì)胞因子之間的作用。通過中藥干預(yù)探討對心肌炎心肌損傷的保護(hù)作用及其作用機(jī)制。 方法：建立重復(fù)感染病毒性心肌炎模型：用CVB3m病毒以劑量梯度倍增方式連續(xù)4次經(jīng)腹腔感染小鼠，治療組于首次接種病毒當(dāng)日給予灌胃給藥，持續(xù)至60天。在末次感染后不同時(shí)期觀察HE染色光鏡下心肌形態(tài)學(xué)變化、臟器指數(shù)變化、VG染色心肌膠原間質(zhì)增生變化、RT-PC

2、R法測定心肌中細(xì)胞因子MMP-1、TIMP-1、TNF-α、TGF-β1的mRNA表達(dá)水平；WesternBlot法檢測心肌中的MMP-1和TIMP-l的蛋白表達(dá)水平，ELISA法測定血清中TNF-α和TGF-β1水平。 結(jié)果：①病理結(jié)果顯示，正常對照組小鼠心肌組織未見異常，中藥組、西藥組小鼠心肌組織病理改變較病毒組明顯減輕。②心臟指數(shù)變化：病毒組、中藥組、西藥組小鼠心臟指數(shù)高于正常組，但病毒組小鼠心臟指數(shù)明顯高于中藥組和西藥組

3、。③病毒性心肌炎急性期(末次感染后5～10d)，心肌內(nèi)壞死灶較多，大量炎細(xì)胞浸潤，TNF-α轉(zhuǎn)錄和翻譯水平明顯增加。MMP-1變化與TNF-α并行；各治療組對早期TNF-αmRNA表達(dá)有抑制作用，同時(shí)亦對MMP-1表達(dá)有抑制作用；在慢性期(末次感染后20d)心肌壞死灶逐漸吸收，膠原增生明顯，血清中TGF-β1表達(dá)增加，心肌中TIMP-1水平與之并行。出現(xiàn)早期心肌纖維化改變。各治療組檢測結(jié)果顯示：對TGF-β1表達(dá)有明顯降低趨勢，同時(shí)亦下

4、調(diào)TIMP-1表達(dá)水平，且與病毒組相比，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論：①本實(shí)驗(yàn)成功地建立了重復(fù)感染致病毒性心肌炎心肌壞死和心室重構(gòu)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。②本研究通過實(shí)驗(yàn)證實(shí)本法對CVB3-VMC具有確切的防治作用，提高慢性VMC小鼠的生存率，減輕小鼠體重的下降，降低小鼠HW/BW的比值，減輕心肌的炎性病變。③本法顯著抑制慢性VMC心肌間質(zhì)膠原增殖，無論從基因水平還是蛋白水平都有顯著下降，從而改善心室重構(gòu)。④通過抑制膠原調(diào)控因子TNF-α，T

5、GF-β1基因表達(dá)間接對MMPs/TIMPs系統(tǒng)平衡的調(diào)節(jié)，來抑制細(xì)胞外基質(zhì)合成與降解的失衡，延緩了心肌纖維化的進(jìn)程。⑤本研究的進(jìn)行為指導(dǎo)臨床治療慢性VMC心室重構(gòu)提供了新的思路和方法。 創(chuàng)新點(diǎn)：本實(shí)驗(yàn)首次系統(tǒng)地觀察了重復(fù)感染致病毒性心肌炎動(dòng)物模型，從急性期到慢性期過程中心肌病理變化，心肌內(nèi)膠原增生情況，MMPs/TIMPs系統(tǒng)動(dòng)態(tài)演變過程及細(xì)胞因子的調(diào)節(jié)作用。首次應(yīng)用中藥干預(yù)來探討對心肌炎小鼠心肌損傷及纖維化的保護(hù)作用，并用分