益氣養(yǎng)陰降濁法對CVB-,3m-重復感染致病毒性心肌炎心室重構影響的研究.pdf

1、目的：探討重復感染致病毒性心肌炎心室重構的發(fā)生機制，MMPs家族在心肌炎心室重構過程的作用及與相關的細胞因子之間的作用。通過中藥干預探討對心肌炎心肌損傷的保護作用及其作用機制。 方法：建立重復感染病毒性心肌炎模型：用CVB3m病毒以劑量梯度倍增方式連續(xù)4次經腹腔感染小鼠，治療組于首次接種病毒當日給予灌胃給藥，持續(xù)至60天。在末次感染后不同時期觀察HE染色光鏡下心肌形態(tài)學變化、臟器指數(shù)變化、VG染色心肌膠原間質增生變化、RT-PC

2、R法測定心肌中細胞因子MMP-1、TIMP-1、TNF-α、TGF-β1的mRNA表達水平；WesternBlot法檢測心肌中的MMP-1和TIMP-l的蛋白表達水平，ELISA法測定血清中TNF-α和TGF-β1水平。 結果：①病理結果顯示，正常對照組小鼠心肌組織未見異常，中藥組、西藥組小鼠心肌組織病理改變較病毒組明顯減輕。②心臟指數(shù)變化：病毒組、中藥組、西藥組小鼠心臟指數(shù)高于正常組，但病毒組小鼠心臟指數(shù)明顯高于中藥組和西藥組

3、。③病毒性心肌炎急性期(末次感染后5～10d)，心肌內壞死灶較多，大量炎細胞浸潤，TNF-α轉錄和翻譯水平明顯增加。MMP-1變化與TNF-α并行；各治療組對早期TNF-αmRNA表達有抑制作用，同時亦對MMP-1表達有抑制作用；在慢性期(末次感染后20d)心肌壞死灶逐漸吸收，膠原增生明顯，血清中TGF-β1表達增加，心肌中TIMP-1水平與之并行。出現(xiàn)早期心肌纖維化改變。各治療組檢測結果顯示：對TGF-β1表達有明顯降低趨勢，同時亦下

4、調TIMP-1表達水平，且與病毒組相比，具有統(tǒng)計學意義。 結論：①本實驗成功地建立了重復感染致病毒性心肌炎心肌壞死和心室重構的實驗動物模型。②本研究通過實驗證實本法對CVB3-VMC具有確切的防治作用，提高慢性VMC小鼠的生存率，減輕小鼠體重的下降，降低小鼠HW/BW的比值，減輕心肌的炎性病變。③本法顯著抑制慢性VMC心肌間質膠原增殖，無論從基因水平還是蛋白水平都有顯著下降，從而改善心室重構。④通過抑制膠原調控因子TNF-α，T

5、GF-β1基因表達間接對MMPs/TIMPs系統(tǒng)平衡的調節(jié)，來抑制細胞外基質合成與降解的失衡，延緩了心肌纖維化的進程。⑤本研究的進行為指導臨床治療慢性VMC心室重構提供了新的思路和方法。 創(chuàng)新點：本實驗首次系統(tǒng)地觀察了重復感染致病毒性心肌炎動物模型，從急性期到慢性期過程中心肌病理變化，心肌內膠原增生情況，MMPs/TIMPs系統(tǒng)動態(tài)演變過程及細胞因子的調節(jié)作用。首次應用中藥干預來探討對心肌炎小鼠心肌損傷及纖維化的保護作用，并用分