細(xì)胞芯片法在急性白血病骨髓樣本免疫分型中的應(yīng)用.pdf

1、目的
　　白血病是導(dǎo)致惡性腫瘤死亡的主要疾病之一，其中急性白血病占35歲以下成人腫瘤死亡首位。據(jù)統(tǒng)計，在發(fā)病率最高的西歐、北美白種人中白血病年死亡率為3.2～7.4/10萬人口;發(fā)病率低的亞洲、南美洲地區(qū)年死亡率為2.8～4.5/10萬人口。我國年發(fā)病率與死亡率為2～4/10萬人口，與歐美等國的類型分布有較明顯的差別。在白血病的診療中，對白血病進行分型成為關(guān)鍵，不同類型的白血病其診療方案不同，療效及預(yù)后也不同。80年代以前白血病的

2、分型主要參照FAB分型標(biāo)準(zhǔn)，采用細(xì)胞形態(tài)學(xué)和組化染色等手段。隨著CD的抗體不斷被國際協(xié)作組確認(rèn)，MICM分型已成為當(dāng)今白血病診斷分型、預(yù)后判斷和殘留病變檢測的標(biāo)準(zhǔn)。目前臨床上進行白血病的免疫分型主要是應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)及免疫組化技術(shù)，其分型受到標(biāo)本量、價格、程序等的限制，而且一次實驗只能分析1～4個表面抗原，漏掉了大量監(jiān)測機體免疫狀態(tài)的表面抗原指標(biāo)。隨著生物芯片技術(shù)的發(fā)展，學(xué)者們開始應(yīng)用這種高通量、并行性、集成化的技術(shù)平臺進行白血病的免疫分

3、型研究。本實驗在前人的基礎(chǔ)上對應(yīng)用于急性白血病免疫分型診斷的細(xì)胞芯片進行深入研究，對急性白血病患者的骨髓樣本進行免疫分型，從而快速診斷白血病的類型。實現(xiàn)為臨床診斷提供快速、簡便、完整的免疫學(xué)資料。
　　方法
　　1.將單克隆抗體點在醛基玻片上，細(xì)胞懸液滴于細(xì)胞芯片，那些有相應(yīng)CD抗原的細(xì)胞只能與相應(yīng)的單克隆抗體的點結(jié)合，進行Wright's染色。
　　2.對65例臨床白血病骨髓標(biāo)本進行分型并驗證結(jié)果。
　　結(jié)果<

4、br>　　1.65例臨床標(biāo)本的細(xì)胞芯片免疫學(xué)分型結(jié)果:52例AML(ANLL):48例表達CD13(92.31％)，33例表達CD33(63.46％)，18例表達CD15，42例表達HLA-DR;8例B-ALL:8例表達CD79(100％)，7例表達CD19(87.5％)和HLA-DR，7例表達CD10(87.5％)，5例表達CD20(62.5％)，5例表達CD22(62.5％)，;5例T-ALL:5例表達CD3(100％)，5例表達C

5、D7(100％)，4例表達CD2(80％)。
　　2.流式細(xì)胞儀對65例臨床樣本的免疫分型結(jié)果:急性髓細(xì)胞白血病主要表達CD13(94.23％)、CD33(69.23％);B系A(chǔ)LL高表達CD79(100％)，CD19(87.5％)，CD10(75.0％);T系A(chǔ)LL中CD2，CD3，CD7均為100％表達。
　　3.經(jīng)Wright's染色后，顯微鏡下進行白血病細(xì)胞形態(tài)學(xué)分析，65例臨床標(biāo)本的FAB分型結(jié)果:M14例，M21