全氟化碳汽化吸入對原發(fā)肺沖擊傷犬生物學(xué)作用及機(jī)制的初步探討.pdf

1、研究背景及目的:原發(fā)肺沖擊傷(Primary blast lung injury,BLI)是導(dǎo)致急性呼吸窘迫綜合征(Acute respiratory distress syndrome,ARDS)的重要病因,是一種特殊表現(xiàn)類型的ARDS。BLI傷情復(fù)雜,致死致殘率高,目前治療方法有限。全氟化碳(perfluorocarbon,PFC)通過改善氧合、抑制肺臟炎癥反應(yīng)而改善ARDS的預(yù)后。但應(yīng)用PFC汽化吸入治療BLI還未見文獻(xiàn)報(bào)道。為此

2、我們通過建立原發(fā)肺沖擊傷犬模型,探討PFC汽化吸入對犬肺沖擊傷的生物學(xué)作用及可能機(jī)制,為肺沖擊傷的治療提供理論依據(jù)。
　　方法:選取健康雜種犬36只(雌雄不限),隨機(jī)分為4組:①正常對照組(C組):不予沖擊波致傷。②單純肺沖擊傷組(B組):給予小型沖擊波發(fā)生器制作BLI模型。③肺沖擊傷機(jī)械通氣組(BM組):給予小型沖擊波發(fā)生器制作BLI模型后,常規(guī)機(jī)械通氣。④肺沖擊傷PFC汽化吸入通氣組(BMP組):給予小型沖擊波發(fā)生器制作BLI

3、模型后,常規(guī)機(jī)械通氣基礎(chǔ)上予PFC汽化吸入。實(shí)驗(yàn)期間觀察7.5小時(shí),每1小時(shí)抽取靜脈血、動(dòng)脈血及記錄血?dú)?、呼吸力學(xué)、血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)變化,實(shí)驗(yàn)結(jié)束后留取支氣管肺泡灌洗液及肺臟組織行病理檢查和分子生物學(xué)檢測。(1)采用小型沖擊波發(fā)生器建立原發(fā)肺沖擊傷犬動(dòng)物模型,觀察肺沖擊傷犬肺組織形態(tài)學(xué)、生理學(xué)指標(biāo)的變化。(2)觀察四組實(shí)驗(yàn)犬肺組織形態(tài)學(xué)、氧合、呼吸力學(xué)、血流動(dòng)力學(xué)的變化;血漿、肺泡灌洗液和肺組織IL-6、TNF-α的含量及表達(dá)變化;血漿、

4、肺組織勻漿液 MDA含量、SOD、GSH-PX活力的變化;肺組織凋亡陽性細(xì)胞光密度值,肺組織Bax、Bcl-2、Caspase-3活性的表達(dá)變化。(3)檢測四組實(shí)驗(yàn)犬肺組織NF-κB、Nrf2、MAPK的表達(dá)變化;應(yīng)用miRNA芯片篩選PFC汽化吸入作用BLI犬差異表達(dá)的miRNA及其靶基因。
　　結(jié)果:1.小型沖擊波發(fā)生器致犬肺沖擊傷后,氧合下降;肺組織水腫明顯;病理改變加重。2.與C組比較,B組血漿、肺泡灌洗液和肺組織IL-6

5、、TNF-α的含量升高、表達(dá)上調(diào);血漿、肺組織勻漿液中MDA含量升高、SOD、GSH-PX活力降低;肺組織細(xì)胞凋亡功能增強(qiáng),抗凋亡蛋白表達(dá)降低,Caspase-3活性增強(qiáng)。與B組比較, BMP組氧合上升;肺水腫減輕;病理改變好轉(zhuǎn);血漿、肺泡灌洗液和肺組織IL-6、TNF-α的含量降低、表達(dá)下調(diào);血漿、肺組織勻漿液中MDA含量降低、SOD、GSH-PX活力增強(qiáng);肺組織細(xì)胞凋亡功能降低,抗凋亡蛋白表達(dá)增強(qiáng),Caspase-3活性降低。與BM

6、組比較,BMP組氣道阻力降低,靜態(tài)順應(yīng)性改善。3.與C組比較,B組肺組織中NF-κB、Nrf2、MAPK活性表達(dá)增強(qiáng);與B組比較,BMP組肺組織NF-κB、胞漿Nrf2、MAPK的活性表達(dá)降低,胞核Nrf2、HO-1活性表達(dá)明顯增強(qiáng)。miRNA芯片篩選PFC作用于BLI犬肺組織差異表達(dá)的miRNA23條及其靶基因449個(gè)。
　　結(jié)論:1.通過小型沖擊波發(fā)生器致傷犬的方法,成功建立了肺沖擊傷犬動(dòng)物模型。2.全氟化碳汽化吸入能夠改善肺