人及小鼠味蕾細胞的培養(yǎng)研究.pdf

1、背景:味覺是由外部刺激作用口腔內的味蕾所引起的感覺,是人及動物感知外界刺激的一種重要方式之一。味覺在維持體內能量平衡和內穩(wěn)態(tài)平衡中起重要作用。在臨床上有一些疾病(如舌癌)及疾病治療方案(如頭頸部腫瘤放療)可引起患者出現味覺障礙,甚至味覺喪失。
　　目前味覺的研究相比于視覺、聽覺和嗅覺的研究嚴重滯后,對于臨床中存在的味覺異常無法及時干預和治療。如果能夠從體外培養(yǎng)的味蕾細胞進行探索,將會極大地加速味覺的研究。目前很少有成功培養(yǎng)出味蕾細

2、胞的報道,因此,建立人及ICR小鼠的味蕾細胞體外培養(yǎng)方法是非常必要的。
　　目的:建立一種穩(wěn)定良好的人及ICR小鼠味蕾細胞培養(yǎng)方法。
　　方法:
　　1.利用HE染色和免疫組織化學方法確定舌背粘膜上味蕾的存在部位。
　　2.取臨床舌腫物手術擴大切除的正常味覺乳頭及ICR小鼠味覺乳頭組織,利用組織塊培養(yǎng)法和酶消化獲得味蕾細胞法進行味蕾細胞的培養(yǎng)。
　　3.以味蕾細胞特異性蛋白對培養(yǎng)出的細胞進行免疫學鑒定。

3、r>　　結果:
　　1.舌背粘膜HE染色發(fā)現,菌狀乳頭、葉狀乳頭、輪廓乳頭含有味蕾,絲狀乳頭不含味蕾。
　　2.舌背粘膜α-gustducin免疫組織化學和免疫熒光顯示味蕾中約有20％~30%的細胞胞質被標記;在CK8免疫組化和免疫熒光顯示味蕾中的細胞胞質均被標記。
　　3.組織塊培養(yǎng)法和酶消化法均能從舌背味覺乳頭中獲得味蕾細胞,并能在體外培養(yǎng)味蕾細胞15d-18d。
　　4.體外培養(yǎng)的味蕾細胞在失去神經支配后能