藏藥牛尾蒿和臭蒿的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及有效成分提取工藝研究.pdf

1、牛尾蒿與臭蒿為菊科同屬植物，在青海省均稱為牛尾蒿，但牛尾蒿藏藥名為普爾芒納保，臭蒿為桑資納博。本文采用文獻(xiàn)查閱法對牛尾蒿、臭蒿進(jìn)行同名異物的考證和現(xiàn)代研究的綜述，用形態(tài)分類法研究牛尾蒿、臭蒿的分類地位，用解剖學(xué)法尋找牛尾蒿與臭蒿的組織解剖性特征，用TLC、HPLC方法研究牛尾蒿、臭蒿的指標(biāo)性成分并建立穩(wěn)定的分析方法，用超臨界CO2流體萃取法萃取與藥材藥效相關(guān)的化學(xué)類成分-香豆素類。
　　本文對臭蒿和牛尾蒿進(jìn)行了本草考證和基源鑒定，

2、并從植物宏觀形態(tài)、葉和莖的微觀組織構(gòu)造以及粉末特征上對臭蒿和牛尾蒿進(jìn)行了系統(tǒng)的生藥學(xué)鑒定，得到在藥材性狀上臭蒿葉為二回櫛齒狀羽狀分裂，牛尾蒿為羽狀5深裂。在解剖特征上，牛尾蒿葉中具明顯的分泌腔而臭蒿葉中難以找到。二者均有東莨菪內(nèi)酯成分，本文對二者的薄層條件進(jìn)行了考察，得到以乙酸乙酯-甲醇-濃氨試液(17∶2∶1)為展開劑，溫度在4℃～40℃范圍，展開距離在8cm～15cm范圍，濕度在35％～75％范圍內(nèi)，東莨菪內(nèi)酯與其它組分很好分離，牛

3、尾蒿和臭蒿的斑點(diǎn)數(shù)不一致，能夠很好的區(qū)別二者。同時本文測定了牛尾蒿和臭蒿樣品水分、總灰分及浸出物，結(jié)果牛尾蒿水分在6.34％～6.44％之間，臭蒿水分在5.86％～6.23％之間;牛尾蒿總灰分在7.38％～7.53％之間，臭蒿總灰分在5.71％～7.73％之間;牛尾蒿浸出物在8.19％～10.12％之間，臭蒿浸出物在25.74％～27.94％之間。
　　本文建立了高效液相色譜法測定臭蒿和牛尾蒿中東莨菪內(nèi)酯含量的方法。首先對色譜條件

4、進(jìn)行了優(yōu)化，色譜柱均為Agilent TC-C18柱（4.6mm×250mm，5μm），臭蒿和牛尾蒿柱溫分別為30℃和35℃，流動相均為甲醇和0.3％磷酸溶液，流量分別為1.0L/min和0.8mL/min，臭蒿兩相梯度洗脫，牛尾蒿兩相等度洗脫，檢測波長都為344 nm。同時對其方法學(xué)進(jìn)行了考察，得出東莨菪內(nèi)酯質(zhì)量濃度與峰面積臭蒿在0.004～0.03mg/ml、牛尾蒿在0.005～0.025mg/ml范圍內(nèi)均呈良好的線性關(guān)系，回歸方程

5、分別為y=6.587E+07x+9863.3和y=1.766E+07x-1304.2467，平均加樣回收率分別為100.64％和99.75％，RSD分別為1.67％和1.90％，表明此方法準(zhǔn)確靈敏、簡便、快速。運(yùn)用此方法測定了9批臭蒿和2批牛尾蒿東莨菪內(nèi)酯的含量，結(jié)果臭蒿含量在0.6811～0.8549 mg/g之間，牛尾蒿含量在0.3813～0.6146 mg/g之間，可做牛尾蒿和臭蒿的質(zhì)量控制指標(biāo)成分。
　　牛尾蒿與臭蒿在藥材

6、性狀上、解剖學(xué)特征均完全不同，雖然兩者均含有東莨菪內(nèi)酯，但含量不同，所以兩者不能混用，應(yīng)分別建立藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。本文初步擬定了兩者的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)草案，兩者水分均應(yīng)低于6.5％，總灰分均不得超過8.0％，臭蒿的浸出物不得少于25.0％，牛尾蒿的不得少于8.0％。牛尾蒿中東莨菪內(nèi)酯的含量不得低于0.3mg/g，臭蒿中東莨菪內(nèi)酯的含量不得低于0.6mg/g。
　　以東莨菪內(nèi)酯為對照品，建立了紫外分光光度法測定臭蒿中總香豆素含量的方法，東莨菪內(nèi)

7、酯平均回收率為99.02％，RSD1.25％，結(jié)果表明此方法快速，簡便，準(zhǔn)確靈敏，運(yùn)用此方法測定臭蒿中總香豆素的含量在1.205％～2.340％之間。此法不僅作為臭蒿中總香豆素提取工藝評價指標(biāo)含量的測定方法，同時也為其它藥用植物總香豆素含量測定提供可借鑒經(jīng)驗。
　　本文探討了超臨界CO2萃取臭蒿中總香豆素的工藝條件，對影響超臨界萃取主要因素進(jìn)行了考察，同時以總香豆素含量為評價指標(biāo)，分別考察夾帶劑種類及用量、萃取時間、萃取壓力、萃取