黃花蒿殺螨活性及有效成分的初步分離研究.pdf

1、本項(xiàng)研究選擇黃花蒿作為研究對(duì)象，明確殺螨活性成分在其植株不同時(shí)期、部位和不同極性溶劑中的分布情況，并對(duì)殺螨活性成分進(jìn)行了提取分離。主要研究成果如下： 1.1不同提取方法和溶劑對(duì)黃花蒿浸提物提取效果比較。采用不同溶劑對(duì)黃花蒿進(jìn)行平行和順序提取，并比較了室溫浸提、恒溫浸提、攪拌提取和索氏提取4種不同提取方法提取率的差別。不同提取方法對(duì)黃花蒿提取率的大小依次為：索氏提?。緮嚢杼崛。竞銣亟幔臼覝亟?。 溶劑系列平行提取時(shí)，以黃

2、花蒿7月葉水平行提取物提取率最高，室溫浸提為20.660﹪，索氏提取為22.693﹪，而丙酮平行提取物的提取率為5種提取溶劑中最低的，室溫浸提時(shí)為6.987﹪，索氏提取也僅為8.710﹪。黃花蒿順序提取物與之相似，依舊是水溶劑的提取率最高，在室溫浸提下水的順序提取物的提取率分別為：7月葉11.680﹪、7月莖4.508﹪、4月地上部分6.536﹪：而丙酮順序提取物的提取率為：7月葉1.240﹪、7月莖0.656﹪、4月地上部分1.469

3、﹪。對(duì)3種黃花蒿不同生長(zhǎng)時(shí)期和部位的材料進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn)，其順序提取物的提取率大小依次為：7月葉＞7月莖＞4月地上部。 1.2黃花蒿浸提物對(duì)朱砂葉螨的生物活性。 1.2.1觸殺活性采用FAO推薦的殺螨活性生測(cè)方法，測(cè)定不同提取物對(duì)朱砂葉螨的觸殺活性。結(jié)果表明，黃花蒿浸提物對(duì)螨具有較好的觸殺活性。其中黃花蒿不同溶劑的順序提取物中，7月葉丙酮順序提取物對(duì)螨的觸殺活性最好，48h校正死亡率達(dá)到90.64﹪，LC50為0.2066g

4、/L。選用水蒸氣蒸餾法對(duì)黃花蒿進(jìn)行提取，精油收率為0.62﹪。采用玻片法熏蒸處理朱砂葉螨24h、48h，LC50分別為289.2294g/L和123.6841g/L。對(duì)比試驗(yàn)結(jié)果表明，1,8-桉葉油素熏蒸殺螨活性明顯比黃花蒿精油高，24h、48h的LC50分別為249.2560g/L、23.7040g/L。根據(jù)已報(bào)道的文獻(xiàn)，1,8-桉葉油素作為主要成分大量存在于黃花蒿精油中，結(jié)合本項(xiàng)試驗(yàn)的比較結(jié)果認(rèn)為1,8-桉葉油素可能是黃花蒿精油具有

5、熏蒸殺螨活性的物質(zhì)。 1.2.2產(chǎn)卵驅(qū)避活性。 采用半葉法測(cè)定不同溶劑的黃花蒿順序提取物對(duì)朱砂葉螨產(chǎn)卵驅(qū)避作用。結(jié)果表明，10g/L黃花蒿7月葉的石油醚、苯、丙酮順序提取物在處理24h后對(duì)朱砂葉螨都有顯著的產(chǎn)卵驅(qū)避效果，以丙酮順序提取物的產(chǎn)卵驅(qū)避率最高，24h、48h均為100.00﹪，其次為苯順序提取物，對(duì)螨的產(chǎn)卵驅(qū)避率為92.75﹪，石油醚、乙醚和水提物活性均不高，分別為57.81﹪、37.70﹪和25.03﹪。@@1

6、.2.3殺卵活性。參照IRAC方法測(cè)定不同溶劑的黃花蒿順序提取物對(duì)朱砂葉螨的殺卵作用。結(jié)果表明，5種黃花蒿7月葉的順序提取物對(duì)朱砂葉螨卵有一定的抑制孵化活性。石油醚、苯、乙醚順序提取物處理48h后，朱砂葉螨校正孵化率分別為17.28﹪、19.94﹪、14.57﹪，96h后，為61.98﹪、64.57﹪和54.20﹪。而對(duì)照卵在48h、96h后的孵化率分別為47.5﹪和96.25﹪，5種提取物處理過(guò)的卵明顯要比對(duì)照的孵化率要低。其中丙酮順

7、序提取物對(duì)卵孵化抑制活性最高，處理48h、96h后的孵化率僅為3.99﹪、14.71﹪，LC50分別為1.7491g/L、1.6606g/L。水順序提取物對(duì)朱砂葉螨卵抑制活性最低，48h、96h后，為30.25﹪和76.43﹪。 1.3黃花蒿浸提物殺螨活性組分的分離。采用梯度洗脫法進(jìn)行分離，從中收集到50個(gè)餾分，通過(guò)薄層層析點(diǎn)樣，合并相同Rf值的物質(zhì)，共得到F1～F7七個(gè)組分。以朱砂葉螨作為供試對(duì)象，用浸玻片法對(duì)7個(gè)組分進(jìn)行觸殺