黃花蒿除草活性物質的提取、分離及結構鑒定.pdf

1、黃花蒿(Artemisia annua Linn.)俗名草蒿、臭蒿等，是菊科艾屬類一年生草本植物。黃花蒿為短日照植物，抗瘠、抗?jié)?、抗旱及抗病能力較強，黃花蒿分布全國各地，棲息地適應性強。黃花蒿在生長過程中不斷釋放除草活性物質抑制其它植物或雜草的萌發(fā)和生長，因而在它們所形成的群落中，很少有其它植物或雜草生長。黃花蒿釋放的化學物質在環(huán)境中易降解，對人、畜毒性低，將為開發(fā)新型天然源生物除草劑提供科學依據，解決化學除草劑對環(huán)境的造成污染問題，為

2、綠色食品生產提供保障。
　　為了明確黃花蒿在雜草防除中的作用，本文對黃花蒿進行了提取，對提取物進行了除草活性和除草機制測定，并對提取物進行了分離和結構鑒定。采用單因素試驗明確了黃花蒿除草活性物質的最佳提取工藝。系統(tǒng)研究了黃花蒿葉部乙醇提取物對不同雜草的活性。從黃花蒿葉部乙醇提取物對蘿卜萌發(fā)生理的影響方面，探討了黃花蒿葉部乙醇提取物的除草機制。以蘿卜種子作為指示受體，采用系統(tǒng)溶劑分離法和柱層析法對黃花蒿葉部乙醇提取物進行了分離、純化

3、，并對除草活性高的流分進行了GC-MS檢測，初步確定了黃花蒿除草活性物質的主要成分。以下為本研究主要結果:
　　1.采用單因素試驗明確了提取方法、采集部位及采集時間對黃花蒿提取物除草活性的影響。結果表明黃花蒿除草活性物質的最優(yōu)提取條件為:采集6月份的黃花蒿葉部，用80％乙醇在超聲功率為800w和超聲時間30mins的條件下，料液比1∶20，第一次攪拌提取8h后超聲30mins，抽濾后留濾液，第二次向濾渣加入300mL80％乙醇攪拌

4、提取6h后超聲30mins，抽濾后留濾液，第三次向濾渣加入300mL80％乙醇攪拌提取6h后超聲30mins，抽濾后留濾液。此提取方法提取的黃花蒿葉部乙醇提取物在濃度2.0mg/mL時，處理72h后對蘿卜種子芽長和根長的抑制率分別為82.05％和82.21％，對蘿卜種子萌發(fā)的ED50為0.75mg/mL，ED90為1.4mg/mL。
　　2.采用室內生物測定法，以反枝莧、苘麻、狗尾草和稗草為受體植物，研究了黃花蒿乙醇提取物對不同雜

5、草種子萌發(fā)的影響，結果表明:黃花蒿葉部乙醇提取物對反枝莧、苘麻、狗尾草和稗草四種雜草種子的萌發(fā)均有不同程度的抑制作用。黃花蒿葉部乙醇提取物5.0mg/mL處理對四種雜草種子萌發(fā)的抑制作用由強到弱的順序為:反枝莧＞苘麻＞狗尾草＞稗草，對反枝莧、苘麻、狗尾草和稗草發(fā)芽率的抑制率分別為90.09％、85.79％、85.46％和14.23％。
　　3.采用室內生物測定法，以反枝莧、苘麻、狗尾草和稗草為受體植物，研究了黃花蒿乙醇提取物對不同

6、雜草的土壤處理活性，結果表明:在5.0kg/hm2時，黃花蒿葉部乙醇提取物對供試雜草的土壤處理活性由強到弱的順序為:反枝莧＞苘麻＞稗草＞狗尾草。處理后14天，對反枝莧、苘麻、稗草和狗尾草的株活性分別為47.50％、43.94％、25.86％和22.97％，鮮重活性分別為49.59％、26.50％、21.05％和20.50％。
　　4.采用室內生物測定法，以大豆、玉米、小麥、高粱、紅豆和綠豆為受體，研究了黃花蒿葉部乙醇提取物對不同作

7、物種子萌發(fā)的影響。結果表明:黃花蒿葉部乙醇提取物對大豆、玉米、小麥和綠豆的萌發(fā)均沒有抑制作用。黃花蒿葉部乙醇提取物5mg/mL處理對紅豆萌發(fā)有輕微的抑制作用，抑制率為9.26％，對高粱萌發(fā)的抑制作用較強，抑制率為86.36％。
　　5.從黃花蒿葉部乙醇提取物對蘿卜萌發(fā)生理的影響方面，探討了黃花蒿葉部乙醇提取物的除草機制。黃花蒿葉部乙醇提取物1.0mg/mL、2.0mg/mL和3.0mg/mL處理7d后，蘿卜種子的吸水量明顯減少，且

8、隨提取物濃度的增加吸水量減少;蘿卜種子中的淀粉含量下降，可溶性糖和可溶性蛋白含量均上升。
　　6.黃花蒿葉部乙醇提取物經系統(tǒng)溶劑分離后，濃度為0.2mg/mL的石油醚相對種子萌發(fā)的抑制率最高，為90.91％，高于乙酸乙酯相和正丁醇相的萌發(fā)抑制率50.22％和19.18％。通過用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇體系為洗脫液，對黃花蒿葉部乙醇提取物進行柱層析分離，共獲得33個流分。采用生物測定活性跟蹤，從中確定出除草活性最強的流分為6號樣品。