川貝母有效成分提取工藝及質(zhì)量標準的研究.pdf

1、貝母 Frritillaira為百合科Liliaceae貝母屬.FritillariaL.植物的干燥鱗莖，是常見的中藥材之一，收錄于《中國藥典》2005版一部。貝母在我國有悠久的使用歷史，有清熱潤肺，化痰止咳之功效，主治肺熱燥咳、咯痰帶血、痰多胸悶等癥。 本論文首先研究了川貝母中有效成分生物堿和皂苷的最佳提取工藝。以貝母總生物堿為指標，采用單因素考察了藥材粒度，再用正交試驗考察了提取時間、提取次數(shù)、料液比對貝母類藥材總生物堿提取

2、的影響，最終確定最佳提取工藝為：時間24小時、料液比40ml、提取次數(shù)2次；采用超臨界C02流體提取技術提取川貝母游離生物堿，選取萃取壓力、萃取溫度、萃取時間和夾帶劑用量作為考察條件進行單因素試驗，在單因素試驗的基礎上，再通過正交試驗。實驗結果顯示C02萃取川貝母游離生物堿的最佳萃取條件為：萃取壓力20MPa，乙醇用量300ml，萃取時間2h，萃取溫度45℃；采用乙醇(甲醇)索式法、乙醚(丙酮)沉淀法提取貝母總皂苷。選取藥材粒度、提取時

3、間、甲醇濃度三因素，通過正交實驗確定了提取總皂苷最佳工藝，結果顯示最佳提取條件為提取時間為8小時，粒度為100目，甲醇濃度100％。 本論文還對川貝母的質(zhì)量標準進行了探討，分別測定了貝母類藥材的微量元素，采用二極管陣列一高效液相色譜的方法初步構建貝母類藥材的指紋圖譜，并利用分子生物學標記技術探索了川貝母的質(zhì)量標準。實驗中利用火焰(石墨爐)原子吸收分光光度儀和定碳、定硫儀對10種不同產(chǎn)地、品種的貝母中16種微量元素進行了測定。以測

4、定結果含量為指標，提取特征因子，再利用特征因子作聚類分析。結果表明微量元素，與中藥質(zhì)量標準有相關性；實驗還對8種不同品種、產(chǎn)地的貝母作了高效液相色譜分析，通過檢測其主要成分生物堿的含量來評價其質(zhì)量。以貝母素甲為標準品，采用外標法，并對8種貝母藥材進行柱前衍生化處理，檢測貝母中生物堿并做出分析。本研究初步建立了川貝母的指紋圖譜，為川貝母的品種鑒定和質(zhì)量評價提供一定的參考；采用用隨機片段多態(tài)性DNA(RAPD)的方法擴增了8個貝母樣品總DN