川貝母的化學(xué)成分研究與貝母屬藥用植物質(zhì)量評價.pdf

1、貝母為一種常用中藥，具有十分悠久的藥用歷史，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為中品：“氣味辛、平，無毒，主傷寒煩熱．淋瀝邪氣，疝癥，喉痹，乳難?！卑俸峡芁iliaeeae中的貝母屬Fritillaria植物是藥用貝母的主要來源，此屬全世界約有130種，主要分布于北半球的溫帶地區(qū)，尤以地中海北岸、伊朗、土耳其等地區(qū)分布的種類最為豐富。 貝母種類繁多，在民間多種貝母屬植物的鱗莖均以貝母入藥，《中國藥典》2005年版一部收載有川貝母、平貝母、

2、浙貝母、湖北貝母、伊貝母等。川貝母(Fritillariacirrhosa D.Don)和梭砂貝母(Fritillaria delavayi Franch.)作為川貝母的主要基源植物，以其干燥鱗莖入藥，能清熱潤肺，化痰止咳。用于肺熱燥咳，干咳少痰，陰虛勞嗽，咯痰帶血。為了進(jìn)一步尋找新的天然產(chǎn)物成分或者活性成分，闡明川貝母藥效作用的物質(zhì)基礎(chǔ)，為貝母屬藥用植物資源的充分利用和合理開發(fā)提供依據(jù)，建立科學(xué)的質(zhì)量評價方法，我們對川貝母的兩種基源植

3、物：川貝母(F.cirrhosa D.Don)和梭砂貝母(F.delavayi Franch.)的化學(xué)成分進(jìn)行了系統(tǒng)研究，并建立了生物堿和核苷兩類成分的含量測定方法，對貝母屬植物的質(zhì)量評價方法作了初步的探討，為貝母屬藥用植物的質(zhì)量控制和品種鑒別提供科學(xué)依據(jù)。 采用多種現(xiàn)代色譜技術(shù)進(jìn)行分離純化，從川貝母的甲醇提取物中分離得到31個化合物，綜合運用理化性質(zhì)和各種光譜技術(shù)(包括IR、UV、ESI-MS、HRESI-MS、1H NMR、

4、13C NMR、DEPT、1H-1H COSY、HMQC、HMBC、NOESY和X-ray等)，鑒定了27個化合物的結(jié)構(gòu)。其中生物堿類化合物15個，分別為：垂茄次堿(demissidine，QB-3)，川貝酮堿(chuanbeinone，QB-9)，梭砂貝母酮堿(delavinone，QB-10)，貝母乙素(verticinone，QB-11)，西貝素(imperialine，QB-12)，蒲貝素B(puqienine B，QB-16)

5、，異梭砂貝母堿(isodelavine，QB-23)，isoforticine(QB-24)，petilidine(QB-25)，貝母甲素(verticine，QB-26)，貝母辛(peimisine，QB-27)，川貝堿甲(cirrhosinineA，QB-35)，川貝堿乙(cirrhosinine B，QB-46)，垂茄次堿苷(demissidine-3-O-β-D-glucopyranosyl(1→4)glucopyranosid

6、e，QB-65)，solanidine3-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-[β-D-glucopyranosyl-(1→4)]-β-D-glueopyranoside(QB-75)；有機(jī)酸類化合物2個：E-肉桂酸(E-cirmamic acid，QB-P-3)，單棕櫚酸甘油酯(2-monopalmitin，QB-P-5)；核苷類化合物8個：尿嘧啶(uracil，QB-N-2)，胸嘧啶(thymine，QB-N-3

7、)，胞苷(cytidine，QB-N-6)，肌苷(inosine，QB-N-7)，尿苷(uridine，QB-N-8)，鳥苷(guanosine，QB-N-10)，胸苷(thymidine，QB-N-11)，腺苷(adenosine，QB-N-12)；甾醇及其苷類化合物2個：β-谷甾醇(β-sitostcrol，QB-P-1)，胡蘿卜苷(daueosterol，QB-P-6)。其中，QB-23，QB-24，QB-35，QB-46和QB-

8、6S等5個化合物為新化合物，QB-P-3，QB-P-5，QB-N-2，QB-N-3，QB-N-6，QB-N-7，QB-N-8和QB-N-10等8個化合物為首次從貝母屬中分離得到，QB-9，QB-10，QB-12，QB-16，QB-2S，QB-7S，QB-P-I和QB-P-6等8個化合物為首次從川貝母中分離得到。 從梭砂貝母鱗莖中共分離得到33個化合物，通過化合物的理化性質(zhì)和各種波譜技術(shù)鑒定了29個化合物。其中生物堿類化合物12個

9、，分別為：川貝酮堿(chuanbeinone，LBM-11)，梭砂貝母酮堿(delavinone，LBM-12)，梭砂貝母啶堿(delavidine，LBM-14)，去氫鄂貝定堿(ebeiedinone，LBM-15)，貝母乙素(verticinone，LBM-16)，西貝素(imperialine，LBM-17)，異梭砂貝母堿(isodelavine，LBM-31)，梭砂貝母堿(delavine，LBM-41)，鄂貝定堿(ebeied

10、ine，LBM-42)，異貝母甲素(isoverticine，LBM-46)，貝母甲素(vertieine，LBM-48)，貝母辛(peimisine，LBM-50)；有機(jī)酸類化合物8個：E-3，4，5-三甲氧基肉桂酸(E-3，4，5-trimethoxycinnamic acid，BM-2)，E-對-甲氧基肉桂酸(E-p-methoxycinnamic acid，BM-3)，E-肉桂酸(E-cinnamic acid，BM-4)，E對

11、-羥基肉桂酸(E-p-hydroxyeinnamic acid，BM-7)，E-對-羥基肉桂酸甲酯(E-p-hydroxycinnamic acid methyl ester，BM-8)，阿魏酸(ferulic acid，BM-11)，咖啡酸(caffeic acid，BM-12)，1-O-feruloylglycerol(BM-15)；核苷類化合物6個：尿嘧啶(uracil，LB-1)，胸嘧啶(thymine，LB-2)，尿苷(uri

12、dine，LB-5)，鳥苷(guanosine，LB-7)，胸苷(thymidine，LB-8)，腺苷(adenosine，LB-9)；甾醇及其苷類化合物2個：β-谷甾醇(β-sitosterol，BM-1)，胡蘿卜苷(daucosterol，BM-17)；萜類化合物1個：蒼術(shù)內(nèi)酯III(atractylenolide III，BM-5)。其中LBM-14為新化合物，BM-2、BM-3、BM-5、BM-7、BM-8、BM-11、BM-1

13、2和BM-15等8個化合物為首次從貝母屬中分離得到，LBM-15、LBM-16、LBM-31、LBM-42、LBM-46、LBM-48、LBM-50、BM-1、BM-4、BM-17、LB-1、LB-2、LB-5、LB-7、LB-8和LB-9等16個化合物為首次從梭砂貝母中分離得到。 在化學(xué)成分研究的基礎(chǔ)上，本文采用HPLC-ELSD法建立了同時測定貝母類藥材中8個生物堿含量的方法，8個生物堿類成分分別為平貝堿甲(pingbeim

14、ineA)、貝母辛(peimisine)、貝母甲素(verticine)、貝母乙素(verticinone)、異梭砂貝母堿(isoddavine)、垂茄次堿苷(demissidine-3-O-β-D-glucopyranosyl(1→4)glucopyranoside)、梭砂貝母酮堿(delavinone)'和川貝酮堿(chuanbeinone)；利用新建立的HPLC-ELSD分析方法對13種貝母60批次樣品中的8個生物堿進(jìn)行了含量測定

15、。建立了13種貝母藥材的HPLC色譜模式，并根據(jù)貝母藥材中生物堿的分布特點，對貝母屬植物的化學(xué)分類學(xué)進(jìn)行了探討。同時，首次建立了用HPLC-DAD法同時測定貝母類藥材中9個核苷類成分含量的方法，9個核苷類成分分別為尿嘧啶(uracil)，胞苷(cytidine)，鳥嘌呤(guanine)，尿苷(uridine)，胸嘧啶(thymine)，肌苷(inosind)，鳥苷(guanosine)，胸苷(thymidine)，腺苷(adenosi

16、ne)。60批次貝母樣品的含量測定結(jié)果表明，核苷類成分普遍存在于各種貝母藥材中，尿苷(Uriftdine)、鳥苷(Guanosine)和腺苷(Adenosine)為貝母類藥材中主要的核苷類成分，由于核苷類化合物具有多種生物活性，因此核苷類可能為貝母類藥材生物堿以外的活性成分。貝母中生物堿和核苷類成分定量分析方法的建立，對貝母類藥材的質(zhì)量控制、品種鑒定具有重要的參考價值，為貝母屬植物的化學(xué)分類學(xué)提供新的科學(xué)依據(jù)，同時為貝母類藥材的臨床合理