B7-H4+巨噬細(xì)胞在肺癌惡性胸水中的表達(dá)及其在上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化中的作用.pdf

1、本文從以下及部分進(jìn)行了論述。
　　一、胸水中CD68+B7-H4+巨噬細(xì)胞的分析及其臨床意義
　　目的：探討胸水中CD68+B7-H4+巨噬細(xì)胞與肺癌惡性胸水的臨床意義。
　　方法：收集蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院、蘇州市第五人民醫(yī)院呼吸科2012年12月至2013年12月收治的82例胸水患者臨床資料。其中,肺癌惡性胸水55例,結(jié)核性胸水27例。收集胸水,采用ficoll密度梯度離心法獲取胸水單個核細(xì)胞(PEMC),流式細(xì)胞術(shù)

2、檢測PEMC巨噬細(xì)胞群中CD68+B7-H4+細(xì)胞比例,并通過ROC曲線探討其對肺癌惡性胸水的診斷價(jià)值。
　　結(jié)果：肺癌惡性胸水與結(jié)核性胸水相比,PEMC巨噬細(xì)胞群中“CD68+B7-H4+細(xì)胞比例”較高(33.57±30.41％VS8.87±6.20％,P<0.001),應(yīng)用ROC曲線(曲線下面積0.919,95％CI0.861-0.977,P<0.001)計(jì)算PEMC巨噬細(xì)胞群中“CD68+B7-H4+細(xì)胞比例”最佳界值為12

3、.05％時,其對肺癌惡性胸水診斷的靈敏度及特異度分別為94.5％和74.1％。
　　結(jié)論：肺癌惡性胸水PEMC巨噬細(xì)胞群中“CD68+B7-H4+細(xì)胞比例”較高;其對鑒別肺癌惡性胸水及結(jié)核性胸水具有一定的應(yīng)用價(jià)值。
　　二、CD68+B7-H4+巨噬細(xì)胞通過分泌TGF-β1誘導(dǎo)肺癌細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化
　　目的：評價(jià)肺癌惡性胸水和TGF-β1誘導(dǎo)肺癌細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)的功能,并研究CD68+B7-H4+巨噬細(xì)胞在E

4、MT中的作用。
　　方法：將普通培養(yǎng)基培養(yǎng)的A549細(xì)胞設(shè)為“對照組”,含肺癌惡性胸水培養(yǎng)基培養(yǎng)的A549細(xì)胞設(shè)為實(shí)驗(yàn)組“胸水組”,含TGF-β1培養(yǎng)的A549肺癌細(xì)胞設(shè)為陽性對照組“TGF-β組”,檢測三組A549細(xì)胞波形蛋白、N鈣粘蛋白、E鈣粘蛋白表達(dá)情況,并用Transwell試驗(yàn)評估三組細(xì)胞的侵襲能力;利用流式細(xì)胞術(shù)胞內(nèi)染色技術(shù)檢測肺癌PEMC中CD68+B7-H4+巨噬細(xì)胞與CD68+B7-H4-巨噬細(xì)胞胞漿內(nèi)TGF-β

5、1的表達(dá)。
　　結(jié)果：“胸水組”和“TGF-β組”A549細(xì)胞呈梭形、EMT相關(guān)蛋白的表達(dá)存在明顯變化,兩組細(xì)胞的波形蛋白、N鈣粘蛋白都較對照組上調(diào)。“胸水組”A549細(xì)胞E鈣粘蛋白的表達(dá)較“對照組”下調(diào)(0.84±0.38％VS17.34±3.32％,P<0.05),“TGF-β組”A549細(xì)胞E鈣粘蛋白的表達(dá)也較“對照組”下調(diào)(0.90±0.10％VS17.34±3.32％,P<0.05),但“胸水組”和“TGF-β組”相比A

6、549細(xì)胞E鈣粘蛋白的表達(dá)未見差異(0.84±0.38％VS0.90±0.10％,P>0.05)?！靶厮M”和“對照組”對比,A549細(xì)胞穿透基質(zhì)膠的數(shù)量較多(97.00±12.49VS46.25±12.5,P<0.05);“TGF-β組”和“對照組”相比,A549細(xì)胞穿透基質(zhì)膠的數(shù)目也較多(107.25±14.31VS46.25±12.5,P<0.05)。但“胸水組”和“TGF-β組”對比,兩組細(xì)胞穿透基質(zhì)膠的數(shù)目未見差異(97.00

7、±12.49VS107.25±14.31,P>0.05)。流式細(xì)胞術(shù)胞內(nèi)染色表明,肺癌惡性胸水 PEMC中CD68+B7-H4+巨噬細(xì)胞胞內(nèi)TGF-β1表達(dá)較CD68+B7-H4-巨噬細(xì)胞上調(diào)(13.16±3.01％VS0.97±0.55％,P<0.05)。
　　結(jié)論：肺癌惡性胸水和TGF-β1都能促進(jìn)A549細(xì)胞發(fā)生EMT。CD68+B7-H4+巨噬細(xì)胞胞漿TGF-β1表達(dá)較CD68+B7-H4-巨噬細(xì)胞上調(diào),可能對促進(jìn)肺癌細(xì)胞