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1、用SMART<'TM>方法建立人18周胎腦的cDNA文庫,然后從中挑選克隆進(jìn)行測(cè)序.測(cè)序引物為M135′通用引物.在測(cè)序中發(fā)現(xiàn)克隆號(hào)為0166c04的5′EST在核酸數(shù)據(jù)庫GenBank/EMBL/DDBJ中沒有同源性大于95﹪的基因,對(duì)該克隆進(jìn)行引物行走(primerwalking),得到全長.得到的序列送到核酸數(shù)據(jù)庫GenBank,登陸號(hào)為AF332356.生物信息分析該序列與許多生物如葡萄球、酵母、果蠅及小鼠的推測(cè)蛋白同源性較高,
2、這些序列都含有保守但尚未研究的一個(gè)結(jié)構(gòu)域.由于該序列與已命名的葡萄菌tRNA合成酶的N端147個(gè)氨基酸同源58﹪,因此將其命名為為人類氨酰tRNA合成酶類似物基因.據(jù)RT-PCR知該基因在胎腦、成人腦、脾、睪丸、卵巢中表達(dá)較高,在胎兒肝、骨骼肌、肺、胸腺、心、腎及成人肝、骨骼肌、肺、胸腺、心、腎、前列腺、小腸、結(jié)腸、白細(xì)胞等組織中無表達(dá).利用綠熒光蛋白在COS7細(xì)胞中將擬編碼的蛋白定位在細(xì)胞漿中.芯片雜交分析其主要在肺癌、前列腺癌中表達(dá)
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