水稻糖原合成酶激酶基因（OsGSK1）的克隆及功能分析.pdf

1、河北師范大學(xué)碩士學(xué)位論文水稻糖原合成酶激酶基因（OsGSK1）的克隆及功能分析姓名：楊獻(xiàn)光申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：遺傳學(xué)指導(dǎo)教師：馬聞師沈銀柱20050601叢播撞愿僉或酶邀醒基固l魚(yú)幽≥的克隆叢功能盆扳!水稻糖原合成酶激酶基因(OsGSKI)的克隆及功能分析摘要糖原合成酶激酶(GSK一3)是一種高度保守的絲氨酸／蘇氨酸蛋白激酶，在動(dòng)物中參與諸如糖原合成、胰島素調(diào)節(jié)、多種蛋白的轉(zhuǎn)錄激活和發(fā)育調(diào)控等許多生命活動(dòng)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。在植物中也分離到

2、_『GSK3屯ike基因，GSKs家族在植物中也扮演著重要的角色，現(xiàn)有的證據(jù)表明，植物GSKs可能參與植物的非生物脅迫應(yīng)答、傷害應(yīng)答以及油菜素內(nèi)酯信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，調(diào)節(jié)花的發(fā)育等等一系列生命活動(dòng)進(jìn)程。與動(dòng)物GSK一3只包括兩個(gè)基因不同，植物GSKs是一個(gè)多基因家族。從擬南芥基因組的分析可知，擬南芥GSKs含有10個(gè)基因，分屬4個(gè)不同的亞家族。本課題研究了水稻糖原合成酶激酶基因的功能和作用機(jī)理。本研究利用RT—PCR技術(shù)從水稻(@弦d勛fiva)

3、中克隆獲得了糖原合成酶激酶基因(命名為儋甾肌)，經(jīng)在GENBANK的核酸數(shù)據(jù)庫(kù)中檢索比對(duì)，可知該eDNA與小麥、玉米、苜蓿、三葉草、擬南芥、煙草等植物的GSK家族成員具有較高的同源性。以儋CSKI片段為探針對(duì)經(jīng)EcoRI、HindIII酶切的基因組DNA進(jìn)行Southern雜交，結(jié)果顯示：在水稻基因組中，出GSKI基因以單拷貝形式存在。為了探究OsGSKI基因的功能，本研究利用Northern雜交方法對(duì)NaCI(1％)、機(jī)械損傷、ABA