苧麻纖維素合成酶基因cDNA的克隆及功能分析.pdf

1、分類號(hào)UDC湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)≈Y9《蠢舅搴鞋密級(jí)——單位代碼!Q5≥Z碩士學(xué)位論文苧麻纖維素合成酶基因cDNA的克隆及功能分析CloningandFunctionalAnalysisofCelluloseSynthaseGenecDNAofRamie(Boehmerianivea)研究生姓名指導(dǎo)教師學(xué)科專業(yè)研究方向圈直豎韭堂塞熬援紐照生物堂僉王細(xì)胞壘物堂提交論文日期2幽壹生旦!旦答辯委員會(huì)主席百灘濤學(xué)位授予日期論文答辯日期2QQ魚生且生旦論

2、文評(píng)閱人群詹雪日睡苧麻纖維素合成酶基因CD雌的克隆及功能分析中文摘要苧麻(Boehmerianivea)是一種我國(guó)傳統(tǒng)的重要纖維作物，其麻皮纖維是主要收獲物。當(dāng)今一些模式植物纖維素合成分子生物學(xué)研究取得了良好的進(jìn)展，為苧麻纖維素合成的分子生物學(xué)研究提供了豐富的參考。本研究以苧麻為材料，提取其總RNA并反轉(zhuǎn)錄成eDNA，通過(guò)設(shè)計(jì)一對(duì)簡(jiǎn)并引物擴(kuò)增出纖維素合成酶基因中間片段，然后通過(guò)RACE技術(shù)分別獲得基因3’端包含多聚A尾的序列和5’端大部

3、分序列(尚缺失包括起始密碼子在內(nèi)的約450bp序列)。將三段序列分別測(cè)序并拼接成一長(zhǎng)3276bp的cDNA序列，其讀碼框可翻譯成一段包含938個(gè)氨基酸的蛋白質(zhì)。經(jīng)BLAST及蛋自質(zhì)結(jié)構(gòu)分析，證實(shí)我們得到的eDNA序列即是苧麻纖維素合成酶基因序列，按照纖維素合成酶基因命名規(guī)則將其命名為BnCesAl，并將此序列提交GenBm血，登陸號(hào)為：DQ077190。為了進(jìn)一步了解BnCesAl基因在苧麻組織中的表達(dá)情況，揭示苧麻纖維素合成及其基因表

4、達(dá)調(diào)控機(jī)制，以BnCesAl基因3’端非保守區(qū)域?yàn)闄z測(cè)目的基因，苧麻18SrRNA為內(nèi)參基因，應(yīng)用RT—PCR技術(shù)對(duì)苧麻纖維素合成酶基因的表達(dá)進(jìn)行半定量，建立一個(gè)針對(duì)BnCesAl的特異、穩(wěn)定的RTPCR半定量檢測(cè)體系。結(jié)果顯示在苧麻根、莖、葉、芽中都可檢測(cè)到BnCesAl基因的表達(dá)，其表達(dá)模式為：莖葉芽根，相對(duì)表達(dá)量依次為：O791，O381，O319，O183；推導(dǎo)BnCesAl蛋白與模式植物擬南芥(Arabidopsisthali