水稻水楊酸甲酯合成酶基因OsBISAMT1的克隆鑒定和功能分析.pdf_第1頁(yè)
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1、在我們實(shí)驗(yàn)室的前期研究中,運(yùn)用抑制性差減雜交法(suppressed subtractive hybridization,SSH)構(gòu)建了水稻誘導(dǎo)抗病性相關(guān)差別表達(dá)cDNA文庫(kù),分離鑒定了200多個(gè)在誘導(dǎo)抗病性中差別表達(dá)的cDNA克隆.同源性搜索結(jié)果表明,其中的一個(gè)差別表達(dá)克隆BIHN-w8與植物水楊甲酯合成酶(S-adenosyl-L-methionine:salicylic acid carboxyl methyltransferas

2、es,SAMT)基因具有較高水平的同源性,因而推測(cè)該克隆中的插入片段可能是水稻一個(gè)SAMT基因的片段.該文克隆和鑒定了該基因的全長(zhǎng)cDNA,命名為OsBISAMT1(Qryza sativa L.benzothiadiazole-inducedSAMT1);同時(shí),分析了OsBISAMT1基因在水稻誘導(dǎo)抗病性、水稻-稻瘟菌互作以及創(chuàng)傷處理中的表達(dá)模式;并將水稻OsBISAMT1基因?qū)霟煵?獲得過(guò)量表達(dá)OsBISAMT1基因的轉(zhuǎn)基因植株,

3、初步分析轉(zhuǎn)基因植株的表型特點(diǎn).為了進(jìn)一步明確OsBISAMT1基因在水稻抗病性中的作用,我們將OsBISAMT1基因的編碼區(qū)置于植物雙元轉(zhuǎn)化載體CHF3的CaMV 35S啟動(dòng)子的下游,構(gòu)建成轉(zhuǎn)化載體,并通過(guò)根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的葉盤(pán)法轉(zhuǎn)化煙草,經(jīng)卡那抗性篩選和PCR檢測(cè)共獲得OsBISAMT1轉(zhuǎn)基因再生植株11株.Southern分析結(jié)果表明OsBISAMT1基因已成功整合到煙草基因組DNA中.Northern分析結(jié)果表明所檢測(cè)的OsBISA

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