大豆水楊酸結(jié)合蛋白基因GmSABP2的克隆及功能分析.pdf

1、在自然界中，植株經(jīng)常受到各種不同的脅迫，如寒冷、干旱或者病原體侵染。為了應(yīng)對(duì)這些脅迫，植物通過不同的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路來激活自身的各種防衛(wèi)反應(yīng)機(jī)制。SA在植物防衛(wèi)反應(yīng)的激活中是一個(gè)關(guān)鍵的信號(hào)。在許多植物（尤其是煙草和擬南芥）中，SA的重要作用都已經(jīng)被證實(shí)。本研究利用電子克隆的方法從豫豆25中克隆得到GmSABP2基因，利用生物信息學(xué)軟件對(duì)其進(jìn)行序列分析;通過熒光定量PCR檢測(cè)大豆幼苗在非生物脅迫時(shí)該基因的表達(dá)特性;通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將GmSAB

2、P2基因轉(zhuǎn)入擬南芥，并利用轉(zhuǎn)基因擬南芥對(duì)GmSABP2基因進(jìn)行功能分析。主要研究結(jié)果如下:
　　1.以擬南芥SABP序列為探針，從豫豆25中克隆得到GmSABP2基因。序列分析表明GmSABP2基因的eDNA序列全長1235bp，包含一個(gè)長為786 bp的開放閱讀框，編碼261個(gè)氨基酸，蛋白分子量為29.15 KDa，等電點(diǎn)為5.58。
　　2.多序列比對(duì)表明大豆SABP2和毛白楊SABP2、可可SABP2以及煙草SABP2

3、相似度較高。系統(tǒng)進(jìn)化分析表明大豆SABP2和毛白楊SABP2、可可SABP2以及煙草SABP2親緣關(guān)系較近。
　　3.qRT-PCR結(jié)果表明，在鹽脅迫和模擬干旱脅迫條件下，GmSABP2基因的相對(duì)表達(dá)量均比正常生長條件下要高。
　　4.在正常培養(yǎng)條件下，野生型植株和轉(zhuǎn)基因株系均能正常萌發(fā)、生長。在高鹽(150 mmol·L-1 NaCl)處理?xiàng)l件下，野生型植株的種子萌發(fā)率為38％,12 d大小幼苗主根長為0.4 em，成熟植