大豆GmFtsH基因的遺傳轉(zhuǎn)化及功能分析.pdf

1、FtsH是由ftsH基因編碼的一種 ATP和Zn2+賴的兼職蛋白，兼具ATP酶活性、蛋白水解活性和類分子伴侶活性，參與生物體內(nèi)許多生理代謝的調(diào)節(jié)，在植物中與多種逆境脅迫密切相關(guān)。目前研究認(rèn)為FtsH蛋白參與PSⅡ核心蛋白D1蛋白光氧化損傷的降解，是植物抵抗光抑制，修復(fù)PSⅡ正常功能的關(guān)鍵成分之一。大豆中還沒有該基因的相關(guān)研究報道。因此，本研究擬在大豆中克隆ftsH基因，分析其生物信息學(xué)特征，轉(zhuǎn)化煙草并初步鑒定其功能，
　　 獲得

2、主要結(jié)果如下：
　　 1.從大豆科豐一號中克隆了GmFtsH基因的cDNA全長，多重序列比較分析表明GmFtsH與其它植物物種FtsH具有很高的同源性，有共同的保守結(jié)構(gòu)域，屬于AAA蛋白酶家族成員；以克隆的GmFtsH為查詢序列，搜索大豆基因組數(shù)據(jù)庫，發(fā)現(xiàn)GmFtsH基因定位于15號染色體，編碼區(qū)包括4個外顯子和3個內(nèi)含子；系統(tǒng)發(fā)育分析表明GmFtsH與AtFtsH2、AtFtsH8、Nt1親緣關(guān)系較近。
　　 2.對大

3、豆科豐一號幼苗進(jìn)行光氧化和干旱脅迫下GmFtsH在不同組織中的熒光定量表達(dá)分析，結(jié)果表明GmFtsH在光氧化劑MV作用下，在根和葉中的表達(dá)量隨時間變化呈上升趨勢，在莖中先出現(xiàn)抑制表達(dá)，4小時后表達(dá)量上升，至12小時達(dá)到原初表達(dá)量的8倍，說明GmFtsH是受MV誘導(dǎo)表達(dá)的，與光氧化脅迫密切相關(guān)；在干旱脅迫下，根和莖中的表達(dá)量隨時間變化不明顯，在葉中表達(dá)量隨時間變化呈上升趨勢，說明GmFtsH在葉中受PEG6000誘導(dǎo)表達(dá)，與干旱脅迫有關(guān)，