Peroxiredoxin Ⅲ的表達(dá)與卵巢癌相關(guān)耐藥及預(yù)后的關(guān)系.pdf

1、卵巢癌(ovarian cancer)在婦科惡性腫瘤中發(fā)病率占第三位,而死亡率居第一位。由于迄今為止尚無(wú)有效的卵巢癌早期診斷方法,故確診時(shí)約70％～80％已屬晚期。根據(jù)NCCN指南,卵巢癌的初次治療首選手術(shù)治療,并輔以術(shù)后鉑類和紫杉醇聯(lián)合化療,經(jīng)過(guò)初次治療約70-80％的卵巢癌患者能夠獲得臨床緩解,但是仍有約60-70％的卵巢癌患者在治愈后的兩年內(nèi)復(fù)發(fā),近20年來(lái)晚期卵巢癌5年生存率一直徘徊在30-40％[1-2],造成卵巢癌5年生存率

2、低的一個(gè)重要原因是腫瘤細(xì)胞對(duì)化療藥物產(chǎn)生耐藥性,所以卵巢癌化療耐藥不僅是當(dāng)前研究的熱點(diǎn),也必將是卵巢癌治療走出瓶頸的關(guān)鍵。
　　 隨著后基因組時(shí)代的到來(lái)及蛋白質(zhì)組學(xué)理論及技術(shù)的迅速發(fā)展和完善,從蛋白質(zhì)這一全新的角度尋找卵巢癌早期篩查和診斷的腫瘤標(biāo)志物以及探討卵巢癌耐藥和復(fù)發(fā)機(jī)制已成為可能[3-5]。Xiu-Qin Li[10]等,應(yīng)用雙向凝膠電泳技術(shù)對(duì)卵巢上皮漿液性腺癌組織及正常卵巢組織蛋白進(jìn)行分離,比較分析篩查差異表達(dá)的蛋白點(diǎn)

3、,經(jīng)肽質(zhì)量指紋譜鑒定技術(shù)鑒定蛋白的身份,發(fā)現(xiàn)12個(gè)蛋白點(diǎn)不匹配,其中PRXDⅢ的表達(dá)明顯上調(diào)。近些年有許多研究結(jié)果顯示,PRXDⅢ在肝癌、乳腺癌、卵巢癌、宮頸癌、惡性間皮瘤、惡性黑色素瘤組織、肺癌、Ⅱ-Ⅳ級(jí)星狀細(xì)胞瘤細(xì)胞的線粒體中表達(dá)均較高[7-15],提示PRXDⅢ參與多種實(shí)體腫瘤中的發(fā)生、發(fā)展。迄今為止PRXDⅢ在卵巢癌中研究報(bào)道較少,而PRXDⅢ是否參與卵巢癌的鉑類耐藥及其機(jī)制尚不清楚。
　　 目的：利用免疫組織化學(xué)方法觀

4、察PRXDⅢ蛋白在耐藥及敏感卵巢癌組織中的表達(dá)情況,探討其與卵巢癌患者化療耐藥情況、臨床病理類型及分化之間的關(guān)系和臨床意義。
　　 資料方法：
　　 一、標(biāo)本來(lái)源
　　 選取我院2005年至2010年之間,經(jīng)我院病理科確診并存檔的卵巢癌患者的石蠟標(biāo)本95例(漿液性:75例,透明細(xì)胞癌:7例,粘液性:6例,子宮內(nèi)膜樣:5例,移行:1例,支持細(xì)胞癌:1例),平均年齡:54.1歲,這些患者均行手術(shù)治療(殘余病灶＜2cm

5、)并術(shù)后給予以鉑類藥物為主的聯(lián)合方案化療。其中根據(jù)NCCN指南患者停止化療后復(fù)發(fā)的時(shí)間,分為鉑類藥物耐藥組、部分敏感組和完全敏感組,耐藥組為化療中病情進(jìn)展或停止化療后6個(gè)月內(nèi)復(fù)發(fā)的患者;部分敏感組為停止化療后大于6個(gè)月,但小于12個(gè)月出現(xiàn)復(fù)發(fā)的患者;完全敏感組為停止化療后12個(gè)月以上才出現(xiàn)復(fù)發(fā)的患者。其中耐藥35例,敏感60例,所有患者均按照FIGO分期進(jìn)行分期,Ⅰ期22例,Ⅱ期14例,Ⅲ期58例,Ⅳ期1例。病理分級(jí)則按照我院病理科病理

6、回報(bào)結(jié)果為準(zhǔn),高分化13例,中分化33例,低分化49例。
　　 二、實(shí)驗(yàn)方法
　　 ①每例各取三張切片,一張片子行HE染色,常規(guī)病理組織學(xué)診斷。兩張片子做組化。
　　 ②確定一抗最佳滴度。
　　 ③免疫組化法。
　　 三、評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)
　　 每張切片隨機(jī)選取5個(gè)高倍視野,使用NIKON-E-800光學(xué)顯微鏡將視野照相,并將相片傳至電腦,通過(guò)NIS-Elements Br3.0軟件將每張切片的5

7、張照片進(jìn)行平均光密度值分析,取5張照片平均光密度值的均值,得出半定量數(shù)值,來(lái)代表每張切片的染色程度。并運(yùn)用半定量數(shù)值進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。
　　 四、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
　　 試驗(yàn)結(jié)果采用SPSS(V17.0)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,率的比較采用X2檢驗(yàn),多組數(shù)據(jù)之間的相關(guān)性分析采用方差分析及t檢驗(yàn)處理,P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果：
　　 一、PRXⅢ蛋白在化療耐藥及敏感卵巢癌組織中表達(dá)情況
　　 P

8、RXⅢ蛋白的陽(yáng)性表達(dá)染色區(qū)域主要集中在細(xì)胞漿中,耐藥及敏感患者PRXⅢ蛋白的表達(dá)的均值分別為0.348±0.069;0.263±0.072。對(duì)兩組數(shù)據(jù)進(jìn)行獨(dú)立樣本T檢驗(yàn),耐藥組表達(dá)高于敏感組,有顯著差異性(P＜0.001)
　　 二、PRXⅢ蛋白在各種病理類型卵巢癌組織中的表達(dá)情況
　　 在卵巢漿液性乳頭狀腺癌、卵巢透明細(xì)胞癌、卵巢粘液性囊腺癌、卵巢移行細(xì)胞癌、卵巢支持細(xì)胞瘤、卵巢子宮內(nèi)膜樣癌中PRXⅢ的表達(dá)的平均數(shù)分別

9、為0.292、0.287、0.337、0.237、0.376、0.275。因卵巢移行細(xì)胞癌、卵巢支持細(xì)胞瘤的例數(shù)較少,不將上述兩種病理類型進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。單因素方差分析結(jié)果表明,4種腫瘤之間PRXⅢ的表達(dá)無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(F=0.660,P=0.579)。
　　 三、PRXⅢ蛋白的表達(dá)與卵巢癌患者臨床分期及分級(jí)之間的關(guān)系
　　 單因素方差分析結(jié)果表明,不同分化的腫瘤組織中PRXⅢ的表達(dá)亦無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(F=1.925,P=0