miRNA-17~92與卵巢癌耐藥關(guān)系的研究.pdf

1、目的:探討miRNA-17～92與卵巢癌耐藥的關(guān)系，為卵巢癌耐藥的研究提供理論依據(jù)。
　　 方法:用病毒介導(dǎo)法將構(gòu)建的miRNA-17～92-PTIP-Sponge all抑制質(zhì)粒轉(zhuǎn)染入耐藥卵巢癌細(xì)胞，用Realtime-PCR方法及Western-Blot方法分別檢測(cè)轉(zhuǎn)染前后miRNA-17～92及PTEN、BIM蛋白的表達(dá)情況，應(yīng)用MTT比色法及流式細(xì)胞技術(shù)分別檢測(cè)轉(zhuǎn)染后耐藥卵巢癌細(xì)胞增殖及細(xì)胞周期的變化情況。
　　

2、 結(jié)果:
　　 1、與敏感卵巢癌細(xì)胞系skov3相比，耐藥卵巢癌細(xì)胞系skov3-tr20中miRNA-17～92高表達(dá)。
　　 2、質(zhì)粒酶切鑒定符合質(zhì)粒結(jié)構(gòu)圖，轉(zhuǎn)染miRNA-17～92-PTIP-GFP及miRNA-17～92-PTIP-Sponge all抑制質(zhì)粒于耐藥卵巢癌細(xì)胞系skov3-tr20中，轉(zhuǎn)染效率達(dá)到97.48％～99.79％。
　　 3、抑制miRNA-17～92表達(dá)使細(xì)胞增殖受到抑制，與

3、轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒相比，紫杉醇濃度為100nM抑制作用最明顯，抑制率為40.4％。
　　 4、不同濃度紫杉醇作用于轉(zhuǎn)染的耐藥細(xì)胞，使細(xì)胞阻滯在G2/M期，但與轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒相比，轉(zhuǎn)染miRNA-17～92-PTIP-Sponge all抑制質(zhì)粒后，當(dāng)其作用濃度為100nM時(shí)阻滯作用更明顯。
　　 5、抑制miRNA-17～92表達(dá)使BIM蛋白表達(dá)升高，而不影響PTEN蛋白的表達(dá)。
　　 結(jié)論:
　　 1、抑制miRN