醫(yī)用臭氧抑制非機(jī)械壓迫性坐骨神經(jīng)痛模型中異常自身免疫反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、　　目的：在大鼠身上建立非機(jī)械壓迫性坐骨神經(jīng)痛模型,以醫(yī)用純氧為陰性對照,運(yùn)用行為學(xué)、組織病理學(xué)評價(jià)醫(yī)用臭氧對該模型的影響,并運(yùn)用透射比濁法、間接ELISA法和免疫組織化學(xué)染色法觀察醫(yī)用臭氧對該模型中外周血免疫球蛋白IgG和IgM、細(xì)胞因子、局部抗原抗體復(fù)合物的影響作用,從而探討醫(yī)用臭氧對坐骨神經(jīng)痛中自身免疫應(yīng)答的影響。
　　方法：
　　1 分組和模型建立：將40只SD大鼠隨機(jī)分為四組,每組10只。A組(正常對照組)

2、,B組(模型對照組),C組(醫(yī)用臭氧組),D組(醫(yī)用純氧組)：切下鼠尾并于其中取出尾椎髓核,置于坐骨神經(jīng)旁,使其接觸但并不壓迫,用彈性硅膠袖套環(huán)繞該段坐骨神經(jīng)予以保護(hù)并縫線固定于周圍肌肉,硅膠導(dǎo)管近端經(jīng)皮下隧道在頸后另取切口引出,正常組不放置自體髓核,其余手術(shù)步驟一致。
　　2 注射干預(yù)：模型建立后第14天,將臭氧發(fā)生器與醫(yī)用純氧氧氣瓶連接,設(shè)定輸出氧濃度為30ug/ml混合氣體臭,向坐骨神經(jīng)區(qū)注射臭氧氣體約5ml；醫(yī)用純氧組

3、同法注射純氧氣體約5ml,注射完畢后將導(dǎo)管近端開口封閉以防止氣體溢出；模型對照組不做任何操作。
　　3 對四組進(jìn)行行為學(xué)、爬坡實(shí)驗(yàn)及后肢機(jī)械縮爪閾值的對比。
　　4 檢測血清免疫球蛋白、IL-6、IL-12、TNF-α含量檢測,坐骨神經(jīng)HE染色、移植髓核中抗原抗體復(fù)合物沉積以及坐骨神經(jīng)PLA2活性測定結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　結(jié)果：
　　1 模型建立后第14天模型對照組,醫(yī)用臭氧組及醫(yī)用純氧組大鼠

4、表現(xiàn)出活動(dòng)頻繁、易激惹的現(xiàn)象,爬坡試驗(yàn)為Ⅲ級,后肢出現(xiàn)較明顯的痛覺過敏(P<0.01),模型建立成功。
　　2 注射干預(yù)后,模型對照組及醫(yī)用純氧組仍然表現(xiàn)出活動(dòng)頻繁、易激惹的現(xiàn)象,爬坡試驗(yàn)為Ⅲ級,后肢機(jī)械縮爪閾值較正常組及注射干預(yù)前明顯降低(P<0.05)；醫(yī)用臭氧組有一只大鼠仍然表現(xiàn)出活動(dòng)頻繁、易激惹的現(xiàn)象,其余大鼠活動(dòng)情況較注射干預(yù)前明顯好轉(zhuǎn),爬坡試驗(yàn)有兩只為Ⅲ級,其余為Ⅳ級,后肢機(jī)械縮爪閾值較模型組及注射干預(yù)前有顯著增高

5、(P<0.05)。
　　3 造模后,模型對照組和醫(yī)用純氧組大鼠坐骨神經(jīng)根出現(xiàn)炎性反應(yīng),有不同程度的神經(jīng)損害；醫(yī)用臭氧組神經(jīng)根炎性反應(yīng)較模型對照組明顯減輕,正常細(xì)胞較模型對照組多。
　　4 模型對照組與正常組相比,總IgG, IgM含量升高(P<0.05)；醫(yī)用臭氧組與模型對照組相比,其外周血總IgG, IgM含量有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的降低(P<0.05),與醫(yī)用純氧組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。
　　5 模型

6、組大鼠血清細(xì)胞因子(IL-6、IL-12、TNF-α)與正常組相比含量明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；臭氧組大鼠血清細(xì)胞因子(IL-6、IL-12、TNF-α)含量較模型組及純氧組明顯降低(P<0.05),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　6 模型組大鼠移植髓核段坐骨神經(jīng)中PLA2與正常組相比含量較對照組明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；醫(yī)用臭氧組與模型組及純氧組相比,大鼠坐骨神經(jīng)中PLA2活性較模型組有明顯降低,

7、差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　7 正常對照組大鼠髓核中無抗原抗體復(fù)合物陽性沉積,模型對照組9只大鼠有抗原抗體復(fù)合物存在,陽性率為 90%,與正常對照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；醫(yī)用臭氧組一只大鼠有抗原抗體復(fù)合物存在,陽性率為 10%,陽性率小于模型對照組(P<0.05)；醫(yī)用純氧組8只大鼠有抗原抗體復(fù)合物存在,陽性率為80%,陽性率與模型對照組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　結(jié)論：