蒼術(shù)合劑抗?jié)冃越Y(jié)腸炎的研究.pdf

1、潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis，UC)，是一種原因不明的慢性結(jié)腸炎，病變主要位于結(jié)腸的黏膜層，且以潰瘍?yōu)橹鳎嗬鄯e直腸和遠(yuǎn)端結(jié)腸，但可向近端擴(kuò)展，以及遍及整個結(jié)腸。主要癥狀有腹瀉，腹痛，膿血便和里急后重。病性漫長，病情輕重不一，常反復(fù)發(fā)作，發(fā)病后18年里，只有1％的患者無復(fù)發(fā)，而且病程越長，惡變的危險性越高。據(jù)現(xiàn)有的研究報告指出，UC在全球范圍內(nèi)均有發(fā)生，北歐、西歐等地區(qū)的發(fā)病率在5/10萬-12/10萬之間，以色列

2、的研究報告指出該國發(fā)病率高達(dá)167/10萬人，我國雖然發(fā)病率不及以上國家，但近幾年隨著人們生活環(huán)境和生活方式的改變，UC的發(fā)病率已有成倍上升的趨勢。目前西醫(yī)治療UC較多的應(yīng)用氨基水楊酸類、皮質(zhì)類固醇、免疫抑制劑等藥物治療，雖有一定的治療效果，但復(fù)發(fā)率較高，長期使用存在較多的副作用。而現(xiàn)代中醫(yī)對UC的病因病機(jī)、治則治法與辨證論治研究較多，并取得了許多西藥無法取得的效果，正日益受到國內(nèi)外學(xué)者高度重視。因此，積極研究開發(fā)標(biāo)本兼治的中藥具有實際

3、的應(yīng)用價值與研究意義。 有鑒于此，根據(jù)UC反復(fù)發(fā)作的癥狀特點(diǎn)與中醫(yī)學(xué)對其“虛實夾雜”的病機(jī)認(rèn)識，中山大學(xué)藥學(xué)院UC研究課題組近年來經(jīng)過大量的處方篩選與臨床經(jīng)驗研究出具有明顯抗UC作用的蒼術(shù)合劑，并綜合研究其治療作用，為進(jìn)一步將蒼術(shù)合劑開發(fā)為療效獨(dú)特、優(yōu)勢明顯的治療UC中藥新藥奠定基礎(chǔ)。 方法 1、蒼術(shù)合劑對潰瘍性結(jié)腸炎大鼠的影響 將大鼠隨機(jī)分成高、中、低劑量組，對照藥復(fù)方黃連素組，正常對照組，和模型對照組

4、，建立潰瘍性結(jié)腸炎的動物模型，從造模后第2天給藥，連續(xù)14天，觀察造模第4、7、10、14d大鼠的糞便次數(shù)，糞便潛血、體重情況的變化；第14天實驗結(jié)束時，從腹腔靜脈取血分離血清，采用微量快速測定法及改良八木國夫法測定血清超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量、用ELSA方法檢檢測血清中的TNF—α和IL—6的水平；解剖大鼠后，取距肛門10cm長末端結(jié)腸，沿腸系膜縱行切開，觀察黏膜組織的損傷情況；同時，取肛門以上6cm處腸段1

5、-2cm用10％甲醛固定、脫水、石臘包埋、切片，用HE染色，在光鏡下觀察病變情況，用免疫組化染色的方法檢測結(jié)腸組織中的TNF—α和IL—6表達(dá)情況。 2、蒼術(shù)合劑的抗炎、止瀉等效應(yīng)觀察 將實驗小鼠隨機(jī)分為蒼術(shù)合劑高、中、低組以及對照藥復(fù)方黃連素組和正常對照組，通過對小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性的影響和角叉菜膠致大鼠足跖腫實驗，考察蒼術(shù)合劑的抗炎作用；通過熱板致痛實驗，考察蒼術(shù)合劑的鎮(zhèn)痛作用；通過番瀉葉致小鼠腹瀉實驗和大腸桿菌致

6、小鼠腹瀉實驗以及小鼠腸推進(jìn)實驗，考察蒼術(shù)合劑的止瀉作用；通過體外抑菌實驗考察蒼術(shù)合劑對大腸桿菌和痢疾桿菌的抑制作用。 結(jié)果： 1、蒼術(shù)合劑對潰瘍性結(jié)腸炎大鼠的影響 通過三硝基苯磺酸致大鼠結(jié)腸炎實驗，表明蒼術(shù)合劑可明顯減輕結(jié)腸炎模型大鼠結(jié)腸組織的損傷變化、及結(jié)腸黏膜的病理改變；蒼術(shù)合劑各劑量組能明顯升高血清及結(jié)腸組織中超氧化物歧化酶(SOD)的活性，降低血清及結(jié)腸組織中MDA含量，抑制血清TNF—α和IL—6的生成

7、及在結(jié)腸黏膜中的表達(dá)。蒼術(shù)合劑中、高效果明顯優(yōu)于市面對照藥復(fù)方黃連素片。提示蒼術(shù)合劑抗?jié)冃越Y(jié)腸炎的作用與其提高抗氧化活性、抑制TNF—α和IL—6等細(xì)胞因子的水平/表達(dá)等密切相關(guān)。 2、蒼術(shù)合劑的抗炎、止瀉等效應(yīng)觀察 通過對小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性的影響以及角叉菜膠致大鼠足跖腫實驗，表明蒼術(shù)合劑各劑量組均能明顯減少小鼠腹腔毛細(xì)血管的通透性，顯著抑制角叉菜膠致大鼠足跖腫的腫脹度(與對照組比較P<0.05)，提示具有良好的抗

8、炎作用。同時，通過小鼠熱板致痛實驗，結(jié)果表明蒼術(shù)合劑中、高劑量(4、8g/Kg)組能明顯延長小鼠熱板添足反應(yīng)潛伏時間(與對照組比較P<0.05)。提示蒼術(shù)合劑有一定鎮(zhèn)痛作用。 通過番瀉葉致小鼠腹瀉實驗和大腸桿菌致小鼠腹瀉實驗以及對小鼠腸推進(jìn)實驗，結(jié)果表明蒼術(shù)合劑各劑量組能明顯抑制番瀉葉致小鼠的腹瀉發(fā)生率和減少濕便粒數(shù)，與模型對照組有明顯統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05或P<0.01)同時，能顯著抑制小鼠小腸對炭末的推進(jìn)率(P<0.05或

9、P<0.01)。提示蒼術(shù)合劑有明顯的抑制腸蠕動和抗腹瀉作用。 3、通過體外抑菌實驗，表明蒼術(shù)合劑對大腸桿菌和痢疾桿菌均具有明顯的抑菌作用，作用強(qiáng)度與市面對照藥復(fù)方黃連素片相接近。 結(jié)論： 蒼術(shù)合劑具有能明顯減輕結(jié)腸炎模型大鼠結(jié)腸粘膜組織的損傷，同時具有明顯的抗炎、鎮(zhèn)痛、抗腹瀉等作用。蒼術(shù)合劑抗?jié)冃越Y(jié)腸炎的作用與其提高機(jī)體抗氧化活性、抑制機(jī)體組織TNF—a和IL—6等細(xì)胞因子的水平、表達(dá)，從而減輕炎癥反應(yīng)等密切相