高同型半胱氨酸血癥促進大鼠腹主動脈球囊損傷后再狹窄過程中尾加壓素II及其受體的表達.pdf

1、背景與目的：經(jīng)皮冠狀動脈腔內成形術(percutaneous transcoronary angioplasty,PTCA)和支架置入術是國內外廣泛應用的冠心病介入治療手段,但術后發(fā)生慢性再狹窄是其治療失敗的重要原因。研究表明,高同型半胱氨酸血癥(Hyperhomocysteinemia,HH)對大鼠腹主動脈球囊損傷后內膜增生有明顯促進作用。作為一種新發(fā)現(xiàn)的血管活性肽尾加壓素II(urotensin II,UII),在促進動脈損傷術后內

2、膜增生過程中的作用尚未清楚。本實驗通過檢測HH大鼠腹主動脈球囊損傷術后增生內膜中的UII及其受體(urotensin II recptor,UT,或稱GPR14)的表達,來了解UII/GPR14系統(tǒng)在HH促進損傷動脈內膜增生過程中所起的作用。
　　材料和方法：200g Sprague Dawley雄性大鼠40只,隨機分為4組:假手術組(C組),高蛋氨酸組(M組),腹主動脈球囊損傷組(I組),腹主動脈球囊損傷+高蛋氨酸組(MI組)。

3、所有動物預飼養(yǎng)一周后,C組、I組予以正常飲食,M組、MI組給予L-蛋氨酸(1g/kg/d)灌胃。4周后利用球囊導管經(jīng)左頸動脈至腹主動脈行血管內膜損傷。C組、M組單純予以分離左頸動脈并結扎,不作腹主動脈內膜球囊損傷,I組、MI組均予以腹動脈球囊損傷。腹主動脈球囊損傷模型制作成功后,C組、I組繼續(xù)予以正常飲食,M組、MI組仍予以L-蛋氨酸(1g/kg/d)灌胃,2周后處死所有實驗組動物,利用酶聯(lián)免疫吸附法和放射免疫學方法分別檢測各組大鼠血漿

4、中同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)和UII的含量,HE染色方法觀察各組大鼠腹主動脈內膜形態(tài)學變化,免疫組織化學方法檢測各組大鼠腹主動脈內膜 UII、GPR14表達情況以及逆轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)方法檢測各組大鼠腹主動脈GPR14mRNA表達。計量資料采用均數(shù)±標準差( x± s)表示,兩組間均數(shù)比較用T檢驗,多組間均數(shù)比較用單因素方差分析,P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
　　結果：L-蛋氨酸負荷灌胃形成

5、HH,MI組、M組血漿Hcy含量均明顯高于C組、I組;I組、MI組大鼠腹主動脈球囊損傷后14天可見新生內膜明顯增厚,其中MI組較I組明顯(P<0.01),而 C組、M組未見內膜增生;免疫組織化學方法分別檢測腹主動脈內膜 UII及GPR14蛋白表達,其中UII在C組、M組內膜少有表達,在MI組與I組則可見呈強陽性表達,且MI組明顯高于I組(P<0.01);而GPR14在四組血管平滑肌及內膜中均有表達,其中MI組增生內膜表達較I組更明顯(P

6、<0.01);利用RT-PCR方法可見各組大鼠腹主動脈均有GPR14 mRNA的表達,MI、I組較C組、M組明顯(P<0.01), MI組與I組間的差異也有統(tǒng)計學意義(P<0.05);而放射免疫學方法測定各組大鼠血漿UII的水平間差異沒有統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
　　結論：HH能夠加重動脈球囊損傷大鼠內膜增生程度,并促進增生內膜 UII及其受體GPR14蛋白及基因表達的增加,提示UII及其受體可能在HH促進損傷血管內膜增生過程