高壓氧對大鼠顱腦爆震傷后皮層腦組織自噬現(xiàn)象變化的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景：顱腦爆震傷是現(xiàn)代戰(zhàn)爭及日常生活中常見的外傷類型，也是目前國內(nèi)外軍事醫(yī)學(xué)研究的重點(diǎn)內(nèi)容。顱腦爆震傷后神經(jīng)細(xì)胞的水腫、變性、壞死等一系列變化，使得顱腦損傷機(jī)制錯(cuò)綜復(fù)雜。自噬（autophagy）是細(xì)胞的一種高度保守降解途徑，將細(xì)胞內(nèi)無用的大分子如長壽命蛋白質(zhì)、細(xì)胞器等運(yùn)送至溶酶體，降解成有生物活性的小分子，并將這些小分子重新利用和維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的過程。近年來發(fā)現(xiàn)自噬在顱腦損傷后表達(dá)增強(qiáng)，可能與顱腦損傷后神經(jīng)元自我保護(hù)作用有關(guān)。高壓

2、氧是一種無創(chuàng)性治療顱腦損傷的輔助性方法，其療效是肯定的，但其具體作用機(jī)制至今尚不清楚。本課題擬建立大鼠顱腦爆震傷模型，研究傷后及高壓氧治療后自噬的變化，并且觀察高壓氧治療對腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞自噬與凋亡的影響。
　　 目的：（1）建立大鼠顱腦爆震傷模型；（2）大鼠顱腦爆震傷后腦皮質(zhì)自噬表達(dá)變化的研究；（3）高壓氧治療對大鼠顱腦爆震傷后腦皮質(zhì)自噬與凋亡的影響。
　　 方法：（1）通過600mgTNT當(dāng)量的電雷管在垂直距離8cm、

3、10cm、12cm處進(jìn)行爆炸，于傷后24h行頭顱MRI檢查，6h、24h、3d、7d行檢測損傷區(qū)光鏡、電鏡下病理變化，選擇合適的爆炸距離，建立穩(wěn)定的動(dòng)物模型；（2）用600mgTNT電雷管在大鼠頭部正上方垂直距離12cm處爆炸，于傷后6h、24h、3d、7d分別采用RT-PCR和Western blotting方法檢測腦皮層中Beclin-1的表達(dá)情況；（3）用600mgTNT電雷管在大鼠頭部正上方垂直距離12cm處爆炸，高壓氧治療組（

4、HBO）分別于傷后3h、22h、及以后每天同一時(shí)間行HBO處理，分別于6h、24h、3d、7d采用RT-PCR和Western blotting方法檢測皮質(zhì)腦組織中Beclin-1和Caspase-3的表達(dá)情況。
　　 結(jié)果：（1）8cm組大鼠幾乎在當(dāng)天全部死亡，10cm組大鼠存活時(shí)間也較短，少有存活7天，12cm組大鼠存活時(shí)間在7天以上，且傷后24小時(shí)MRI提示挫傷區(qū)存在血腫及挫裂傷，病理學(xué)提示皮質(zhì)、腦膜、腦室周圍、神經(jīng)元胞體

5、、線粒體等均出現(xiàn)不同程度水腫；（2）在傷后6h腦皮層中Beclin-1的表達(dá)上升，傷后3d表達(dá)最強(qiáng)，傷后7d表達(dá)有所下降；（3）與對照組相比，Beclin-1和Caspase-3在爆震傷組及HBO組表達(dá)均增加，而HBO組中Beclin-1和Caspase-3表達(dá)則較爆震傷組有所減少。
　　 結(jié)論：（1）600mgTNT電雷管在距離大鼠頭部垂直12cm處可制作穩(wěn)定的大鼠顱腦爆震傷模型；（2）大鼠顱腦爆震傷后，腦皮層中Beclin-